[发明专利]一种蛋白G金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种蛋白G金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒及其制备方法，其特征在于：本试剂盒由96孔酶标板、蛋白G重组蛋白抗金黄色葡萄球菌肠毒素A单克隆抗体、抗金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体、含辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌肠毒素抗体酶标物、样本稀释液、洗涤液、终止液组成，其中酶标板为蛋白G预处理过的酶标板。

2.根据权利要求1所述的一种蛋白G金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒，其特征在于：蛋白G是经过基因优化后在大肠杆菌中重组表达的蛋白。

3.一种蛋白G金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒的制备方法，其特征在于：所述方法通过如下步骤建立：

1）包被ELISA板：首先用包被液将蛋白G稀释到0.1~1μg/ml，100μl/孔；包被到ELISA微孔板内，37℃孵育2h；洗板：取出酶标板甩掉板内液体，用洗涤液（PBST）洗涤板孔，200~400μl/孔，洗涤2次；再用10mMpH7.4PBS缓冲液将抗SEA/SEB抗体稀释到0.01~1μg/ml，100μl/孔；分别包被到ELISA微孔板内，37℃孵育0.5h；

2）洗板：取出酶标板甩掉板内液体，用洗涤液洗涤板孔，200~400μl/孔，洗涤2次；

3）封闭：100~200μl/孔封闭液，37℃孵育2h；

4）干燥：取出酶标板甩掉板内液体，排干，37℃烘干3h；

5）ELISA反应：每孔加入100μL样品或标准品，室温静置1h，用洗板液洗涤4次，再加入100μL的酶标抗体，室温静置1h，用洗板液洗涤4次；

6）显色：每孔加入反应底物150μL，室温避光反应15min；每孔加入50μL终止液中止反应；

7）读数：用酶标仪在主波长450nm，次波长630nm下检测，测定每孔OD值。