[发明专利]动物样品分级去除脂肪的方法

权利要求书

1.动物样品分级去除脂肪的方法,其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)浓硫酸除脂，鱼肉样品初级净化

将鱼肉样品干燥、研磨后，经过萃取，萃取提取液旋转浓缩，用正己烷将旋转蒸发后的鱼肉样品转移至玻璃样品瓶，加入质量浓度为95-98％浓硫酸，涡旋振荡，混合均匀后进行离心处理，收集上清液；

再加入质量浓度为95-98％浓硫酸，按照上述同样的步骤净化两次，收集上清液；

(2)溶剂淋洗收集，鱼肉样品二级净化

将用浓硫酸除脂后收集的上层清液使用层析柱进行进一步净化处理；层析柱包括纯化柱、净化柱；

步骤(2)所述的层析柱净化处理，包括以下过程：

先用正己烷将纯化柱、净化柱润湿，将气泡赶出，将柱子压实；将待净化的浓缩鱼肉样品用滴管移入纯化柱中，保证鱼肉样品与纯化柱充分接触交换；然后将正己烷用滴管移入纯化柱中，以60滴/分钟的流速流出，将收集液载入净化柱，此时流出的淋洗液不进行收集；

待纯化柱中的液体完全流干后，移走纯化柱，然后用30mL正己烷和二氯甲烷混合物洗脱净化柱，正己烷和二氯甲烷的体积比为7:3；洗脱液用平底烧瓶进行收集；将收集的鱼肉样品浓缩液，保存在零下20℃冰箱中，待测；

所述的纯化柱从上到下依次装入4g无水硫酸钠、8g酸性硅胶、1g硅胶；净化柱从上到下依次装入4g无水硫酸钠、8g酸性氧化铝，干法填柱；

硅胶为60-200目；酸性氧化铝为50-200目；硅胶在180±2℃条件下活化12h，冷却至室温；酸性氧化铝在170±2℃条件下活化12h，冷却至室温；

酸性硅胶通过以下方法制备所得：加入浓硫酸对硅胶进行酸化处理，硫酸占浓硫酸和硅胶总重量30％，添加过程中用滴管逐滴加入，边滴加边用力振荡防止结块，浓硫酸全部添加完后超声振荡30min，放置12h平衡。