[发明专利]一种利用人自体骨髓间充质干细胞制备组织工程体的方法

权利要求书

1.一种利用自体骨髓间充质干细胞制备组织工程体（TissueEngineering Construct，TEC）的方法，其特征在于，所述组织工程体制备包括自体骨髓间充质干细胞 （BoneMarrowMesenchymalStemCells，BMSCs）的采集、分离、培养、扩增和冻存，以及利 用扩增后的骨髓间充质干细胞制备组织工程体的具体方法。

2.根据权利要求书1所述，骨髓采集前采集患者外周血250ml，制备富含血小板血清裂 解液（PRP），用于自体BMSCs的培养。

3.根据权利要求书1所述，制备组织工程体所采用的BMSCs为第二代（P2）。

4.根据权利要求书1和3所述，制备组织工程体初始细胞接种密度为4.0x10⁵/cm²。

5.根据权利要求书3所述，制备组织工程体所采用的细胞培养液成分为：DMEM，外加10% 的PRP，其它必须的培养液成分包括Doxy，和抗坏血酸等。

6.根据权利要求书3所述，制备组织工程体过程中，先进行细胞的常规培养一周，再通 过微量加样器冲洗收集细胞层，继续进行特殊培养使组织结构收缩。

7.根据权利要求书3所述，制备组织工程体过程中，继续培养后TECs可以悬浮在PBS中 备用。