[发明专利]一种食醋中耐高温产气嗜酸菌的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及酿造食醋检测技术领域，尤其是一种食醋中耐高温产气嗜酸菌的检测方法。

背景技术

食醋是以粮食为原料，通过微生物制曲、糖化、酒精发酵、醋酸发酵等工艺和各种氨基酸、酶制剂的结合酿制而成的。在成品醋生产过程中会有微生物的存在，例如：霉菌、酵母菌、一定数量的细菌以及放线菌。根据食醋属于调味性食品的属并综合其风味，其灭菌条件为：60-80℃恒温20-30min或者醋液加温到100℃维持5min，若无特殊污染，上述条件可以将食醋在酿造过程中的菌杀死，且符合现如今酿造食醋的卫生标准GB2719-2003所制定的微生物要求：大肠菌群少于3MPN/100mL，菌落总数不得超过10000cfu/mL，不得检出致病菌，灌装密封后不会出现产气嗜酸现象。若其出现产气嗜酸现象则说明被其他菌污染，上述灭菌条件则不能将其杀死，则不能符合酿造食醋卫生标准中的大肠菌群和菌落总数(指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数)的要求。因此，简单且快速检测出造成酿造食醋产气嗜酸现象的菌种类和位置尤为关键。

食品微生物检测指标有三个：大肠菌群、菌落总数以及致病菌。常见微生物检测方法有：培养膜法、螺旋平板计数法、滤膜法、ATP生物荧光法、电阻抗法、颜色变化法、流式细胞仪技术以及激光扫描技术等，这些技术成本高，不适于工业化生产的公司进行微生物检测。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种具有降压功效的组合物。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述具有降压功效的组合物的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种食醋中耐高温产气嗜酸菌的检测方法，具体步骤如下：

(1)按重量体积比g/ml或按体积比计将待测样品以1：10的比例稀释并摇匀(样品为固体时，10g样品放入含有100mL蒸馏水且一起灭菌的三角瓶；样品为液体时，10mL样品放入含有100mL蒸馏水且一起灭菌的三角瓶)；

(2)取稀释后溶液继续进行梯度稀释，将步骤(1)中稀释溶液和每个梯度的稀释液样品各取6mL用于微生物实验，其中，每个试管1mL，共两个试管用于检测大肠菌群；每个平板各1mL，共四个平板——两个平板检测菌落总数，另外两个平板检测霉菌；

(3)菌群静止培养，其中，

大肠菌群37℃静置培养24h±2h；

菌落总数37℃静置培养48h±2h；

霉菌以及酵母菌28℃静置培养5-7d±2h，计数观察过后，利用伊红美蓝培养基检测具有会发生产气嗜酸现象的菌，进行挑菌划线，划线后37℃静止培养24h±2h，培养过后，进行染色并用显微镜观察确定染菌。

对于染菌的种类以及最后对其理化指标进行检测可利用BIOLOG鉴定系统。

优选的，上述食醋中耐高温产气嗜酸菌的检测方法，所述步骤(2)中梯度稀释的方法为1mL稀释液加入含有9mL蒸馏水且一起灭过菌的试管中，一次稀释2次。

优选的，上述食醋中耐高温产气嗜酸菌的检测方法，所述步骤(3)中使用伊红美蓝培养基对引起产气嗜酸菌进行检测，所述伊红美蓝培养基的组方为每升培养基中：蛋白胨10g；乳糖10g；磷酸氢二钾2g；琼脂20-30g；2％伊红水溶液20ml；0.5％美蓝水溶液13ml；其余为水(蒸馏水或去离子水)；搅拌至完全溶解，121℃高压灭菌15min即得。

原理：当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落；在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色，伊红和美蓝不能结合，故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培养基上不生长。

优选的，上述食醋中耐高温产气嗜酸菌的检测方法，所述步骤(3)中：

大肠菌群的检测，使用乳糖胆盐培养基，所述乳糖胆盐培养基的组方为每升培养基中：胨20.0g；乳糖5.0g；氯化钠5.0g；磷酸氢二钾4.0g；磷酸二氢钾1.3g；去氧胆酸钠/牛胆盐0.5g(去氧胆酸钠)/2.0g(牛胆盐)；其余为水(蒸馏水或去离子水)；最终pH＝7.4±0.2；

使用方法：在烧杯中称取上述各组分加入蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，115℃灭菌15min，待冷至常温后，备用；

原理：胨提供碳氮源；乳糖是可发酵的糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂；牛胆盐和去氧胆酸钠为选择性抑菌剂；