[发明专利]一种反胶束体系萃取蒜氨酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蒜氨酸的提取方法，具体涉及一种反胶束体系萃取蒜氨酸的方法。

背景技术

大蒜一直以来都广泛用于治疗和预防一些疾病，已经发现其中的含硫化合物具有很好的医疗效果，尤其在预防癌症方面，其中的一种风味前体物质蒜氨酸（S-烯丙基-L半胱氨酸亚砜）具有预防作用。研究表明蒜氨酸具有抗过氧化物、抗糖尿病、抗氧化抑菌、抗肿瘤以及抗癌等作用；当生大蒜被压碎或者切碎的情况下，蒜氨酸会发生酶促反应生成大蒜素，大蒜素也具有抗菌、抗肿瘤、抑制免疫调节等作用，但是大蒜素易分解不易保存，而蒜氨酸医药保健特性和大蒜素相差不大，并且蒜氨酸较稳定易保存，所以最好的方法是直接获取蒜氨酸。

目前从大蒜中提取蒜氨酸方法主要是采用水或者水醇混合物进行直接提取，但是提取时间长，而且提取率低。

反胶束是将表面活性剂溶解在非极性有机溶剂中，并使其浓度超过临界浓度，碳氢链向外，亲水基向内组成，形成的球状极性核内具有一定数量的水，称为“水池”，其能够溶解可溶性极性物质。

反胶束提取在回收、分离和纯化目标生物分子方面具有巨大潜力，反胶束中“水池”可以选择性的溶解生物分子并保护其生物活性不被破坏，这是反胶束最大优势。此外，反胶束体系具有热力学稳定性、光学透明性、以及成本低、节能、稳定状态下可以连续操作等特性，因此很有利于大规模生产及质量控制。目前关于使用反胶束方法提取大蒜素的技术未见报道。

发明内容

为弥补现有技术的不足，本发明提供一种提取时间短，提取纯度高的反胶束体系萃取蒜氨酸的方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种反胶束体系萃取蒜氨酸的方法，其特殊之处在于：包括以下步骤：

（1）取干燥蒜片，微波灭酶后粉碎过筛；

（2）取浓度为0.03-0.08mol/L的十六烷基三甲基溴化铵置于100mL锥形瓶中，向其中加入正庚烷、正辛醇和含有KCl的磷酸缓冲溶液，超声震荡至十六烷基三甲基溴化铵完全溶解，溶液呈透明后得到反胶束溶液，其中，KCl的浓度为0.2-0.5mol/L，磷酸缓冲溶液pH值为6.0-8.0；

（3）向反胶束溶液中加入蒜粉，所述的蒜粉与反胶束溶液的质量体积比为1：（37.5-150）g/mL，在25-50℃下超声提取5-40min后，离心分离，所得上清液为反胶束的前萃液；

（4）向前萃液中加入含有KI的磷酸缓冲溶液进行反萃取，KI溶液浓度为0.5-1.0mol/L，磷酸盐缓冲溶液pH为4.0-6.0，反萃取后离心分离得有机相和水相；

（5）将水相用乙醇沉淀，浓缩，真空干燥，得到蒜氨酸。

本发明的反胶束体系萃取蒜氨酸的方法，步骤（1）中过筛优选80目筛。

本发明的反胶束体系萃取蒜氨酸的方法，步骤（2）中正庚烷和正辛醇的体积比为9:1，十六烷基三甲基溴化铵的浓度优选为0.07mol/L，KCl的浓度优选为0.3mol/L，磷酸缓冲溶液pH值优选为7.0。

本发明的反胶束体系萃取蒜氨酸的方法，步骤（3）中离心转速为3000r/min，离心时间为20min，蒜粉与反胶束溶液的质量体积比为1：60 g/mL，萃取温度优选为40℃，萃取时间优选为30min。

本发明的反胶束体系萃取蒜氨酸的方法，步骤（4）中加入含有KI的的磷酸缓冲溶液的体积与前萃液的体积相等，反萃取温度为40℃，反萃取时间为30min，KI浓度优选为0.8mol/L，磷酸盐缓冲溶液pH值优选为5.0。

本发明的反胶束体系萃取蒜氨酸的方法，步骤（5）中水相沉淀选用体积分数为80%的乙醇。

本发明的有益效果是：

（1）采用反胶束技术只需前萃和反萃两步就可以达到萃取纯化的目的，步骤简单，操作方便；

（2）萃取纯化蒜氨酸回收率高；

（3）具有提取时间短，实验容易放大等优点，可应用于工业提取蒜氨酸。

附图说明

附图1是本发明的工艺步骤示意图。

具体实施方式

实施例1

（1）蒜粉的制备

取干燥蒜片，微波灭酶后在高速粉碎机上粉碎，粉碎后过80目筛；

（2）反胶束溶液的配制

称取1.09g十六烷基三甲基溴化铵（CTAB），置于100mL锥形瓶中，同时加入54mL正庚烷和6mL正辛醇，超声震荡使其溶解，随后加入适量含0.5mol/L的KCl的磷酸盐缓冲溶液，调节缓冲溶液使其pH为7.0，继续超声振荡至CTAB完全溶解，溶液透明，得到反胶束溶液；