[发明专利]一种酶法合成头孢丙烯的方法

说明书

本发明涉及一种酶法合成头孢丙烯的方法，头孢丙烯母核、D‑对羟基苯甘氨酸甲酯和/或D‑对羟基苯甘氨酸乙酯、水、青霉素酰化酶在10~25℃反应得头孢丙烯粗品和酶反应母液，控制温度为0~15℃，pH值为0.2~0.8，加入N,N‑二甲基甲酰胺，搅拌均匀，加入晶种进行养晶，调节pH值至5.5~6.5，控制温度为10~30℃，得到头孢丙烯N,N‑二甲基甲酰胺复合物；控制温度为0~25℃，向反应器中加入水和头孢丙烯N,N‑二甲基甲酰胺复合物，搅拌转晶1~4.5小时，然后经过滤、洗涤、抽干、干燥得到头孢丙烯成品。本发明产品收率高、纯度高、外观呈白色，制备方法简单易行，条件温和，更适宜产业化生产。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种酶法合成头孢丙烯的方法。

背景技术

头孢丙烯为第三代口服广谱头孢类抗生素，是由美国Bristol-Myers公司、东京研究所开发，1992年12月获FDA批准上市。头孢丙烯合成方法很多，但本世纪以前均是化学合成方法，其制备工艺所用原料以及辅料较多，要使用大量的溶剂如：二氯甲烷、丙酮等，反应条件也较为苛刻，往往要求-50℃以下的低温，成本高，污染大。进入到21世纪后，随着生物技术的发展和酶基因改造技术的突破，用生物合成技术代替传统化学合成方法渐成一种新的药物合成的发展趋势。生物酶法合成具有污染少，仅以水为媒介，合成成本低，比化学反应副反应少，质量高的特点。

如申请公布号CN105063158A，申请公布日为2015-11-18的一种头孢丙烯的合成方法，但是，其需要将7-APRA加入纯化水后氨水溶解，左旋对羟基苯甘氨酸甲酯需要用盐酸溶解后，再加入青霉素酰化酶进行反应，反应结束后，用筛网分离青霉素酰化酶和头孢丙烯悬浊液液，用盐酸完全溶解头孢丙烯悬浊液，活性炭脱色过滤后，溶液用氨水调pH4.5~5.0，温度2~20℃，将头孢丙烯结晶出来，然后进行干燥得到头孢丙烯。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种收率高、纯度高的酶法合成头孢丙烯的方法。

为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案：

一种酶法合成头孢丙烯的方法，包括如下步骤：

步骤（1）、向反应器中加入头孢丙烯母核、D-对羟基苯甘氨酸甲酯和/或D-对羟基苯甘氨酸乙酯、水、青霉素酰化酶，在10~25℃反应1.5~5.5小时，然后经分离得到所述的青霉素酰化酶和头孢丙烯粗品混合液，所述的头孢丙烯粗品混合液经过滤得到头孢丙烯粗品和滤液，滤液经多次洗涤去除所述的青霉素酰化酶后得到酶反应母液，其中，所述的青霉素酰化酶的添加质量为所述的头孢丙烯母核的添加质量的0.8~1.2倍；

步骤（2）、将所述的头孢丙粗品和所述的酶反应母液加入反应器中，控制温度为0~15℃，调节反应体系的pH值为0.2~0.8，加入为所述的酶反应母液体积1.5~6.5倍的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），搅拌均匀，加入晶种进行养晶2~5小时，调节养晶后反应体系的pH值至5.5~6.5，控制养晶温度为10~30℃，然后经过滤、洗涤、抽干得到头孢丙烯N,N-二甲基甲酰胺复合物；

步骤（3）、向反应器中加入水，控制温度为0~25℃，向所述的反应器中加入所述的头孢丙烯N,N-二甲基甲酰胺复合物，搅拌转晶1~4.5小时，然后经过滤、洗涤、抽干、干燥得到所述的头孢丙烯成品。

其中，所述的头孢丙烯母核7-APCA结构式为：。

所述的D-对羟基苯甘氨酸甲酯的结构式为：，所述的D-对羟基苯甘氨酸乙酯结构式为：。

优选地，步骤（1）中，所述的头孢丙烯母核、所述的D-对羟基苯甘氨酸甲酯和/或D-对羟基苯甘氨酸乙酯的投料摩尔比为1:1~1.2，所述的水的添加量为每1g所述的头孢丙烯母核添加9~15mL所述的水。

优选地，步骤（1）中，控制反应温度为15~22℃，反应时间为2~3.5小时。