[发明专利]人尿液α1-酸性糖蛋白检测试剂盒

说明书

技术领域

本公开涉及医学免疫体外诊断领域，具体涉及一种用胶乳增强免 疫透射比浊法检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒。

背景技术

α1-酸性糖蛋白(α1-acidglycoprotein，AAG，早期称之为乳清粘蛋 白)分子量近40kD，含糖量约45％，pI为2.7-3.5，包括等分子的已糖、 已糖胺和唾液酸。AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增 高，显然与免疫预防功能有关。AAG由肝和某些肿瘤组织合成。分解 代谢首先经过唾液酸的分子降解而后蛋白质部分很快在肝中消失。 AAG可以结合利多卡因和普萘洛尔，在急性心肌梗死时AAG作为一 种急性时相反应蛋白可以升高，而干扰药物剂量的有效浓度(如王克 夷，1991)。

AAG是目前较为敏感的急性期反应的炎症标志物，是急性时相反 应物之一。其对炎症、感染反应早于体温及白细胞数的变化，故广泛 用于临床。

2型糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一，也是近年来糖尿病患 者死亡的主要原因之一。如果能在2型糖尿病患者糖尿病肾病发生的 早期及时作出诊断并进行干预性治疗，肾脏的微损病变可以得到好的 控制甚至发生逆转。目前，国内外普遍将24h尿白蛋白排泄率测定作 为糖尿病肾病早期诊断的重要指标。但是，最近一系列的研究报道却 对尿白蛋白在预测和诊断糖尿病肾病中的可靠性提出了质疑，认为其 特异性和敏感度并不是很理想。将尿中的AAG作为辅助诊断指标之 一，对2型糖尿病患者糖尿病肾病的发生发展有较好的预测价值(如 鞠北华等人，2013年；ChristiansenM.S等人2005；)。健康的人尿中的 AAG的含量为0.29至0.68mg/24h。高于一定的阈值，则肾组织损害不 可逆转，且肾功能受损加剧的几率很大。

目前，市场上检测α1-酸性糖蛋白的试剂盒由于灵敏度低，样本仅 限于血清，无法检测人尿液中α1-酸性糖蛋白(例如CN103076456A和 CN103529221A中所公开的试剂盒)。针对人尿中AAG含量较少，本 领域所要解决的技术问题是提供一种胶乳增强免疫透射比浊法检测人 尿液中酸性糖蛋白含量的试剂盒，其灵敏度高、重复性好、操作简单、 能够进行批量样本检测。

发明内容

鉴于上述技术问题，本公开提供一种检测人尿液中α1-酸性糖蛋白 的试剂盒，该试剂盒包含：第一试剂、第二试剂和任选地校准品。

在一些实施方式中，所述第一试剂包含缓冲液、电解质、表面活 性剂、稳定剂、防腐剂。在一些实施方式中，所述的第二试剂包含： 缓冲液、包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒、电解质、防腐剂。在 一些实施方式中，所述校准品包含：缓冲液、浓度已知的α1-酸性糖蛋 白、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂。

在一些实施方式中，所述第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液 的pH在5.5至9.0之间；例如5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5；在 一些具体的实施方式中，缓冲液的pH在6.0至7.5之间。在本申请上 下文中，表述“在…之间”包含端点值。

在一些实施方式中，所述第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液 的浓度在10至100mmol/L之间；例如，10、12、15、20、25、30、35、 40、45、50、60、70、80、90、100mmol/L；在一些具体的实施方式 中，浓度在10至25mmol/L之间。

在一些实施方式中，第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液各自 独立地选自：TRIS/HCl缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、巴比妥 缓冲液及其组合。在一些具体的实施方式中，缓冲液是TRIS/HCl缓冲 液。

在一些实施方式中，第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液的种 类、浓度或pH值分别是相同的或者是不同的。

在一些具体的实施方式中，第一试剂中缓冲液是TRIS/HCl缓冲液， pH在7.0至7.5之间，且浓度在15至25mmol/L之间；优选为20mmol/L pH为7.5的TRIS/HCl缓冲液。

在一些具体的实施方式中，第二试剂中缓冲液是TRIS/HCl缓冲液， pH在7.0至7.5之间，且浓度在10至15mmol/L之间；优选为10mmol/L pH为7.5的TRIS/HCl缓冲液。