[发明专利]一种高效纤维素酶混合物的生产方法及应用

权利要求书

1.一种高效纤维素酶混合物的生产方法，所述方法包括：以里氏木霉或草酸青霉为纤维素酶生产菌进行发酵，整个发酵期间pH始终维持在3.5-6.5之间，发酵至48-60h，开始补料，补料后控制还原糖含量≤2.5mg/mL，每4-5h为一补料速率调整阶段，至结束发酵；

补料的培养基为：葡萄糖母液或木糖母液与硫酸镁、硫酸锌的混合液；

其中葡萄糖母液成分包括：45～60％葡萄糖，15～30％的二糖及5～10％的多糖，其余为水；木糖母液成分包括：45～70％木糖，5～20％葡萄糖，5～15％阿拉伯糖，其余为水；

所述补料培养基中还原糖浓度为20％～40％，硫酸镁浓度为0.5～1％，硫酸锌浓度为0.003～0.008％。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述二糖为麦芽糖。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，发酵培养基中采用非可溶性碳源玉米芯、玉米秸秆、小麦秸秆、木糖渣、脱木素渣中的一种或多种，作为菌株发酵的主要碳源。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，发酵培养基为：2～7％固体非可溶性碳源，1～4％麸皮，0.2～1％微晶纤维素，0.5～1.5％豆饼粉，0.1～0.4％硫酸铵，0.1％尿素，0.3％磷酸二氢钾，0.05％硫酸镁，0.3％吐温80。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，补料后，1.5mg/mL≤还原糖含量≤2.5mg/mL。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，补料后溶氧降低，通过改变发酵搅拌桨叶或搅拌速度来弥补溶氧的降低；优选的，补料过程通过控制搅拌或更换搅拌桨叶保持溶氧≥10％，更为优选的，保持溶氧≥15％。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，发酵开始pH调整为5.5-6.0，0-20hpH逐渐下降，用氨水控制发酵培养基pH3.5以上，60h后pH回升至5.5-6.0后，开始用磷酸调节pH至6.0以下。

8.权利要求1-7任一项所述生产方法得到的纤维素酶混合物。

9.权利要求8所述纤维素酶混合物用于水解纤维素底物的用途，优选的，所述纤维素底物为预处理的木质纤维素底物，如预处理的秸秆。

10.一种水解纤维素底物的方法，包括：将权利要求8所述纤维素酶混合物加至纤维素底物以形成反应混合物，其中纤维素酶混合物以每克底物5-10U纤维素酶混合物的浓度添加。