[发明专利]一种聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂HS-1及其应用

权利要求书

1.一种聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂HS-1。

2.根据权利要求1所述的一种聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂HS-1，其特征在于： 所述聚乙二醇的分子量为20000，氨基酸序列如SEQID：NO.1所示，为 mPEG-SC20k-Ser-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-G ly-Arg-Asp。

3.一种如权利要求1所述的一种聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂的制备方法，其特 征在于：包括如下步骤：

1)、合成HS-1：a、称取Fmoc-Ser-Wangresin倒入玻璃砂芯反应柱中，加入二氯 甲烷使树脂膨胀；b、加入六氢吡啶/DMF脱帽；c、洗涤：将脱帽液抽干，用DMF洗涤树 脂，抽干，取树脂放置到小试管内，加入验色剂，加热；d、缩合：称取保护氨基酸和HOBt， 溶于DMF和DIC，倒入反应釜中反应；e、洗涤：将反应液抽干，用DMF洗涤树脂，抽干， 取树脂置于小试管内，加入验色剂，加热；f、切肽：把抽干的树脂装入圆底烧瓶中，加 入切割液，密封反应，将树脂与多肽分离；g、后处理：先加无水乙醚到切割液中将多肽 析出，离心，把清液倒掉，然后再用无水乙醚洗涤多肽，抽干得多肽粗品；

2)、纯化HS-1：a、溶解：称取ID-18粗品，加入纯化水配置成溶液，超声搅拌至 无颗粒状澄清溶液；b、过滤：将ID-18的溶液用沙芯过滤器过滤；c、制备：一次纯化； d、平衡：冲洗制备柱；上样：用输液泵上样，并采集基线，检测是否有样品冲出；

3)、聚乙二醇修饰多肽：按照摩尔比为1.5∶1，分别称取PEG和HS-1，置于配好 的pH5-8.5的PBS缓冲溶液中，过夜反应；

4)、分离纯化：a、分离：对反应后的样品应用半制备型高效液相进行纯化在目的 峰出峰过程中，用离心管收集产物；b、纯化：将经过HPLC收集的产物首先于-70℃低温 冰箱预冻过夜，之后于提前遇冷的冷冻干燥机冻干，直到目测全为白色粉末为止，收获 冻干产物。

4.一种权利要求1或2所述的聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂HS-1在实体肿瘤治 疗中的应用。

5.根据权利要求4所述的聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂HS-1在实体肿瘤治疗中 的应用，其特征在于：聚乙二醇修饰的血管生成抑制剂HS-1可用于乳腺癌和宫颈癌的治 疗。