[发明专利]一种食品中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸残留量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测方法，尤其是一种食品中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸残留量的测定方法。

背景技术

草甘膦(glyphosate，GLY)，化学名称N-(膦酰基甲基)氨基乙酸，是目前世界上应用最广、生产量最大的广谱非选择性除草剂，但其不合理的使用仍会导致其过高地残留于植物体中。草甘膦及其主要代谢物氨甲基膦酸(aminomethylphosphonicacid，AMPA)具有与有机磷化合物相似的作用毒理，主要通过抑制胆碱脂酶的活性而导致神经系统机能失调，由草甘膦引起的水体污染植被破坏、牲畜中毒等案件也逐年增加。

我国《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》(GB2763-2014)于2014年8月1日起开始施行，其明确规定：草甘膦是谷物、油料和油脂、糖料、水果、茶叶等的农药残留强检(必检)项目，其在这些产品中的残留限量在0.05-5毫克每千克之间。与中国主要贸易国/地区对食品中草甘膦的残留限量要求为中国1mg/kg，中国香港1mg/kg，美国1mg/kg，日本1mg/kg。

由于草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸均为强极性化合物，不溶于大部分有机溶剂，既没有紫外吸收，又不易挥发，因此，用气相色谱或高效液相色谱检测往往需要借助于柱前或柱后衍生化，其步骤繁琐，重复性差，质控难；或者采用离子色谱法，但在分离GLY时由于其保留很强，其分离必须采用强淋洗剂碳酸钠，而其它常见阴离子保留较弱无法对GLY和其它阴离子进行同时分析，且仅限于对水等较为单一的基体的测试。

发明专利CN101646348B公开了一种测试基质中草甘膦、N-乙酰草甘膦、N-乙酰AMPA或氨甲基磷酸(AMPA)和它的各种代谢物的存在或含量的方法，其净化采用离子交换固相萃取柱，很多样品如香蕉、柠檬、茶末等会堵塞固相萃取柱造成没法操作，而且回收率非常低小于5％，需要用昂贵的内标物来校正回收。发明专利CN103529148B公开了一种食品中除草剂草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留量的检测方法，主要由提取、吸附、淋洗、洗脱、定性定量分析五个步骤组成，其以镁铝二元水滑石吸附提取液中残留的草甘膦和氨甲基膦酸，然后分别以水和甲醇淋洗镁铝二元水滑石，还需要以碳酸钠溶液对吸附在水滑石中的草甘膦和氨甲基膦酸进行解吸，操作麻烦。基于上述方法都有其局限性，建立一种快速、简捷检测食品中草甘膦及其代谢物的方法是十分必要的。

发明内容

本发明所要解决的问题是克服现有技术存在的不足，提供一种食品中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸残留量的测定方法。

具体方案如下：

一种食品中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸残留量的测定方法，包括以下步骤：(1)制备标准工作溶液：以水作溶剂，分别配置成草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸的标准工作溶液；(2)制备食品样品试液：(a)称取样品试样，质量为m，加水于高速均质器上离心均质，收集水相或者上层液相，用水定容至体积为v；(b)取上述步骤(a)中定容的试液，加入透析袋内，置于玻璃管中，加入超纯水超声，取出透析出的残液，注入二乙烯基苯固相萃取小柱内，弃去二乙烯基苯固相萃取小柱前流出液，收集后流出液；(c)向收集的后流出液中加入石墨化碳黑，作为吸附剂去除样品提取溶液中水溶性色素干扰，旋窝震荡后离心，取上清液，氮吹至干，残渣用水溶液溶解，过聚四氟乙烯膜，得到食品样品试液，备用；(3)采用高效液相色谱-串联三重四级杆质谱联用仪，对步骤(1)的标准工作溶液分别进行液相色谱-串联质谱测定：以标准工作溶液中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸的浓度x为横坐标，以对应的测得的定量离子峰面积y为纵坐标，绘制标准工作溶液回归曲线y＝ax+b，计算出回归曲线的斜率a和截距b；(4)采用高效液相色谱-串联三重四级杆质谱联用仪，对步骤(2)的食品样品试液进行液相色谱-串联质谱测定，根据(3)中所获得的线性方程y＝ax+b推算出食品样品试液中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸的浓度c₀，进而计算食品样品中草甘膦及其代谢物氨甲基磷酸的残留量c，c＝c₀×v/m。