[发明专利]一种用于BHK-21细胞高密度悬浮培养的低血清培养基及其在口蹄疫病毒增殖中的应用有效
申请号: | 201510980603.7 | 申请日: | 2015-12-23 |
公开(公告)号: | CN105505853B | 公开(公告)日: | 2019-03-15 |
发明(设计)人: | 刘学荣;武发菊;安芳兰;殷宏;董文教;葛玉凤;张荣;孙玉霞;张云德 | 申请(专利权)人: | 中农威特生物科技股份有限公司;中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N7/00;C12R1/93 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;马鑫 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 bhk 21 细胞 高密度 悬浮 培养 血清 培养基 及其 口蹄疫病毒 增殖 中的 应用 | ||
1.一种用于BHK-21细胞高密度悬浮培养的低血清培养基,其特征在于由氨基酸部分,平衡盐部分,维生素部分、其他添加物、血清以及蒸馏水组成,pH值7.0~7.2,其中,血清添加浓度为1%v/v,其他各原料物质在培养基中的终浓度为:
①氨基酸部分,包括:
②平衡盐部分,包括:
③维生素部分,包括:
④其它添加物,包括:
2.根据权利要求1所述的一种用于BHK-21细胞高密度悬浮培养的低血清培养基,其特征在于由氨基酸部分,平衡盐部分,维生素部分、其他添加物、血清以及蒸馏水组成,pH值7.0~7.2,其中,血清添加浓度为1%v/v,其他各原料物质在培养基中的终浓度为:
①氨基酸部分,包括:
②平衡盐部分,包括:
③维生素部分,包括:
④其它添加物,包括:
3.权利要求1或2所述的培养基在进行BHK-21细胞的悬浮培养中的用途。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于所述的悬浮培养,其培养条件为:接种密度为0.50×106个/ml,培养温度为37.0~37.5℃,pH值为7.0~7.2,DO值为60.0%~80.0%,搅拌转速为60~80r/min,培养48h进行传代。
5.权利要求1或2所述的培养基在以BHK-21细胞作为宿主细胞进行病毒增殖中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于所述的病毒增殖包括向经权利要求1或2所述的培养基培养得到的BHK-21细胞接种病毒,设定控制参数为:温度36.5~37.0℃,pH值为7.4~7.6,DO值为60.0%~70.0%,搅拌转速为40~60r/min,进行病毒增殖培养。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于所述的病毒为口蹄疫病毒。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于所述的口蹄疫病毒为FMD/O/MYA98/BY/2010、FMD/Re-A WH/09和FMD/Asia1JSL/06毒株。
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