[发明专利]用于预防或治疗宫颈癌的、包含人乳头瘤病毒变形体及免疫增强剂的组合物

说明书

本发明涉及用于预防或治疗包括人乳头瘤病毒变形体及免疫增强剂的宫颈癌的组合物。更具体地，融合蛋白通过诱导HPV16及18型抗原特异性免疫应答治疗由HPV引起的肿瘤，所述融合蛋白包括：融合多肽，该融合多肽被重组以使人乳头瘤病毒16及18型的抗原E6、E7的三维结构变形；信号肽，该信号肽用于分泌所述融合多肽；和免疫增强肽。

技术领域

本发明涉及用于预防或治疗宫颈癌的、包含人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus；HPV)变形体及免疫增强剂的组合物。更具体地，融合蛋白通过诱导HPV16和18型抗原特异性免疫应答治疗由HPV引起的肿瘤。所述融合蛋白包括融合多肽(Polypeptide)、信号肽及免疫增强肽，所述融合多肽被重组，以使作为人乳头瘤病毒16和18型的抗原E6、E7的三维结构变形。

背景技术

众所周知，宫颈癌(cervical cancer)是由于受人乳头瘤病毒16和18型等的高危型人乳头瘤病毒的感染而引起的疾病(zur Hausen,H et al.Biochem Biophys Acta1996,1288；F55-F78,Mark H et al.J Natl Cancer Inst 1993,85；958-964)。在HPV蛋白中E6、E7蛋白对宫颈癌的发病起主要作用，而且已确认在宫颈癌患者的肿瘤组织中表达99％，从而成为制备用于治疗和预防宫颈癌的疫苗的主要靶物质(von Knebel Doeberitzet al.Int.J.Cancer 1992,51；831-834)。E6与已知用作肿瘤抑制蛋白p53结合，通过促进p53的分解，用细胞凋亡(apoptosis)途径阻止细胞周期的进行。E7与作为肿瘤抑制因子的视网膜母细胞瘤蛋白pRb(retinoblastoma protein)结合，通过使之失活并促进其分解，诱导细胞周期进入S期(Cobrinik et al.,Trends Biochem Sci 1992,17:312-5)。

然而，为治疗宫颈癌，在使用通过同时表达HPV16的E6、E7蛋白的核酸序列的组合物的临床试验中，其疗效并不显著(Garcia F et al.Obstet Gynecol 2004,103；317-326)。此结果表明，仅施用HPV抗原是无法发生足以治疗或抑制宫颈癌的抗原特异性免疫应答的。

因此，为治疗子宫癌，需增强E6、E7的免疫原性(immunogenicity)，并且需消除所述蛋白的致癌能力。

发明内容

技术问题

本发明的目的在于，提供用于预防或治疗由HPV引起的疾病的新型融合蛋白及编码所述融合蛋白的多核苷酸(polynucleotide)。所述融合蛋白可抑制HPV E6、E7蛋白的致癌能力并展现增强的免疫原性。

本发明的另一个目的在于，提供表达所述融合蛋白的重组载体(recombinantvector)、包含所述载体的宿主细胞以及用所述宿主细胞表达融合蛋白的方法。

本发明的另一个目的在于，提供用所述融合蛋白的、用于预防或治疗由HPV引起的疾病的组合物。

本发明的另一个目的在于，提供用所述组合物的、用于预防或治疗由HPV引起的疾病的方法。

技术方案

为达到上述目的，一方面，本发明提供融合蛋白，该融合蛋白包括：融合多肽，即三维结构变形的、源于人乳头瘤病毒16和18型并包含SEQ ID NO：1氨基酸序列的E6、E7；用于分泌所述融合多肽的信号肽；和免疫增强肽。

另一方面，本发明提供多核苷酸，该多核苷酸用于编码本发明的融合蛋白。

另一方面，本发明提供重组载体，该重组载体包括本发明的多核苷酸。

另一方面，本发明提供宿主细胞，该宿主细胞由本发明的重组载体转化而成。