[发明专利]一种提取甘露聚糖肽的方法

权利要求书

1.一种提取甘露聚糖肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤A：采用α-淀粉酶和糖化酶酶解魔芋飞粉原料，去除魔芋飞粉中的淀粉，得到飞粉酶解液；

步骤B：用碱液提取步骤A得到的飞粉酶解液中的蛋白，得到飞粉蛋白液；

步骤C：使用截留分子量为2,000Da的中空纤维式超滤膜对步骤B得到的飞粉蛋白液进行预超滤分离，除去小分子糖，得到预超滤截留液；

步骤D：同步酶解一级超滤，在步骤C得到的预超滤截留液中加入蛋白酶，得到截留液-蛋白酶混合液，同时将所述截留液-蛋白酶混合液通过第一超滤柱2进行一级超滤分离，得到截留液I和滤出液I；所述第一超滤柱2包含截留分子量为XDa的中空纤维式超滤膜；

步骤E：酶解液二级超滤，使步骤D得到的滤出液I通过温控容器3进入第二超滤柱4进行超滤分离，得到截留液II和滤出液II；所述第二超滤柱4包含截留分子量为YDa的中空纤维式超滤膜；

所述步骤D中，第一超滤柱2的超滤条件：压力0.02～0.1Mpa，温度20～70℃；pH值为7～10；膜通量为1～20升/小时；

所述步骤E中，第二超滤柱4的超滤条件：压力0.02～0.1Mpa；温度5～15℃；pH值为7～10；膜通量为1～20升/小时；

所述步骤E与所述步骤D同步连续进行，所述步骤D中得到的截留液I回到进料容器1后再进入所述第一超滤柱2循环往复进行一级超滤分离；所述步骤E中得到的截留液II回到温控容器3后再进入第二超滤柱循环往复进行二级超滤分离;

所述步骤E中得到的滤出液II是包含有蛋白酶的滤出液，所述蛋白酶的分子量为ZDa；所述含有蛋白酶的滤出液收集到酶液收集器中后可以重新添加到进料容器1中使用；

步骤F：将所述温控容器3中最终收集到的超滤产物浓缩干燥，得到甘露聚糖肽提取物；上述技术方案中，200,000Da>X>Y>Z>2,000Da；

X为80,000Da，Y为50,000Da，Z为27,000Da。

2.如权利要求1所述一种提取甘露聚糖肽的方法，其特征在于，所述步骤A中，魔芋飞粉原料中α-淀粉酶和糖化酶的加酶量分别为26RAU/g和50WU/g；

所述步骤B中，采用氢氧化钠将酶解液pH调至6～10，料液比设置为1:15～1:40，提取温度为30～70℃，提取时间10～40min，提取3次，离心得到飞粉蛋白液；所述步骤C中，预超滤条件：压力0.02～0.1Mpa；温度5～45℃；pH值为3～12；膜通量为1～20升/小时。

3.如权利要求1所述一种提取甘露聚糖肽的方法，其特征在于，所述步骤D和所述步骤E在一个同步酶解多级超滤装置中完成，所述同步酶解多级超滤装置包括进料容器1，第一超滤柱2，温控容器3，第二超滤柱4和酶液收集器5；

所述进料容器1上设置用于添加样品液的加料口11，进料容器出口13，以及进料容器进口12；

所述第一超滤柱2设置第一超滤柱进口21，第一超滤柱截留液出口22，第一超滤柱滤出液出口23；所述第一超滤柱进口21与所述进料容器出口13连接；所述第一超滤柱截留液出口22与进料容器进口12连接；

所述温控容器3设置温控容器第一进口31，温控容器第二进口32，以及温控容器出口33；所述温控容器第一进口31与所述第一超滤柱滤出液出口23连接；

所述第二超滤柱4设置与所述温控容器出口33连接的第二超滤柱进口41，以及与所述温控容器第二进口32连接的第二超滤柱截留液出口42；

所述截留液-蛋白酶混合液通过加料口11进入进料容器1；

所述截留液II从温控容器3中收集。