[发明专利]H10N8亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测引物组、试剂盒及其应用在审
申请号: | 201510988413.X | 申请日: | 2015-12-25 |
公开(公告)号: | CN105368988A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | 谢芝勋;罗思思;谢志勤;黄莉;谢丽基;邓显文;范晴;黄娇玲;张艳芳;王盛;曾婷婷 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 王正茂 |
地址: | 530001 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | h10n8 禽流感 病毒 二重 rt pcr 检测 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用于鉴定H10N8亚型禽流感病毒的引物组,其特征在于:包括2对特异性引物,分别是引物对H10-1和H10-2、引物对N8-1和N8-2,其分别具有如SEQIDNo.1至SEQIDNo.4所示的序列。
2.一种用于鉴定H10亚型禽流感病毒的引物对,包括特异性引物H10-1和H10-2,它们分别具有序列表SEQIDNo.1至SEQIDNo.2的碱基序列。
3.一种用于鉴定N8亚型禽流感病毒的引物对,包括特异性引物N8-1和N8-2,它们分别具有序列表SEQIDNo.3至SEQIDNo.4的碱基序列。
4.一种H10N8亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测试剂盒,包括反转录试剂、PCR试剂、DEPC水和无RNA酶的超纯水,其特征在于:所述的PCR试剂中含有2对特异性引物,分别是引物对H10-1和H10-2、引物对N8-1和N8-2,其分别具有如SEQIDNo.1至SEQIDNo.4所示的序列。
5.根据权利要求4所述的H10N8亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:所述的特异性引物H10-1和H10-2,N8-1和N8-2在所述的PCR试剂中的终浓度为0.1-0.8μM。
6.根据权利要求4所述的H10N8亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:所述的反转录试剂每管16μL,其中5×ReverseTranscriptaseBuffer10μL、50pmol9merRandomPrimer2μL、10mMdNTPMixture2μL、40URibonucleaseInhibitor1μL、5U/μLAMVReverseTranscriptase1μL。
7.根据权利要求4所述的H10N8亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:所述的PCR试剂的体积为26.2μL/管,其中包含2×EasyTaqTMPCRSuperMix25μL,50μMH10-1和H10-2引物各0.2μL、50μMN8-1和N8-2引物各0.4μL。
8.根据权利要求1所述的用于鉴定H10N8亚型禽流感病毒的引物组、权利要求2-3任一所述的引物对或权利要求4-7任一所述的H10N8亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测试剂盒在鉴别H10N8亚型禽流感病毒中的应用。
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