[发明专利]一种乳酸球菌菌株M23及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种乳酸球菌M23及其应用。

背景技术

随着抗生素在畜牧生产中大量使用所带来的种种弊端的日益凸显,如导致动物肠 道正常菌群失调,动物整体免疫低下,产生耐药性细菌甚至发生抗生素在畜禽产品中的残 留,开发替代抗生素的新型环保安全高效的绿色饲料添加剂已成为必然趋势。

近年来，益生菌替代抗生素来促生长、预防和治疗炎症性肠病成为研究的热点，益 生菌在动物生产中已有广泛的应用和研究。其中，肉鸡饲喂乳酸杆菌的研究越来越多，尤其 乳酸菌制剂在肉鸡生产中得到广泛的应用，它作为一种活性制剂能够提高肉鸡生产性能和 改善肠道环境。目前，乳酸菌种类繁多，不同的益生菌菌种、益生菌的添加水平对促生长效 应也各不相同；而且肉鸡日增重也不理想，例如现有罗伊氏乳杆菌单一菌剂、卷曲乳杆菌单 一菌剂及其它们的复合制剂，每克活菌含量仅为10⁷cfu，肉鸡日增重均在50～52g；北京中 农颖泰生物技术有限公司研制的高端乳酸菌微生态制剂，商品名康福特100，饲喂42天肉鸡 日增重为51.97±4.75g；同时由于饲养环境的差异，益生菌结果不一致性变得越来越复杂 因此，寻找一种效果稳定、具有最佳肉鸡日增重特点、可制备活性制剂的优良乳酸菌菌种成 为进一步研究的课题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种效果稳定、具有最佳肉鸡日增重特点、可 制备活性制剂的优良乳酸球菌菌株M23及其应用。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是，

本发明从陕西杨凌地区采样，从散养肉鸡肠道中分离筛选出一批乳酸菌，并从中 发现一株屎肠球菌，该菌命名为屎肠球菌，EnterococcusfaeciumJM23，该菌株JM23已保 藏于中国典型培养物保藏中心，其简称为JM23，保藏编号为CCTCCM2015679，保藏日期为 2015年11月18日。保藏地址：湖北省武汉市武昌珞珈山，武汉大学保藏中心。邮编：430072

本发明之一种乳酸球菌菌粉，包括乳酸球菌菌株M23。

本发明之一种乳酸球菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备乳酸球菌菌株M23的种子液；

(2)制备发酵液：将步骤(1)中制备的种子液转接到液体培养基中，在36～38℃培 养12～24h,作为发酵用菌种；

(3)扩大培养：在发酵罐中加入液体培养基，119～125℃灭菌15～30min；灭菌完成 后降温降至36～38℃；将步骤(2)中制备的发酵液以体积比为0.5～2％的比例接种到液体 培养基中；在温度36～38℃，转速100～300rpm，pH6～7，连续发酵12～24h，即得发酵菌液；

(4)制备菌粉：将步骤(3)中所得的发酵菌液用超高速离心机以转速6000～ 10000rpm/min离心15～25min；弃上清液，收集菌泥，在菌泥中加入保护剂，加入量为菌泥重 的8～12％，然后搅拌均匀，冷冻干燥20～30h后研成粉末状，即得乳酸球菌M23菌粉。

进一步，包括以下步骤：

(1)制备种子液：从平板上挑乳酸球菌菌株M23的单菌落接种到MRS液体培养基，在 37℃培养箱培养16h；

(2)制备发酵液：将步骤(2)中制备的种子液以体积比为1％的比例转接到MRS液体 培养基中，37℃培养16h,作为发酵用菌种；

(3)扩大培养：在发酵罐中加入MRS液体培养基，121℃灭菌20min；灭菌完成后，降 温降至37℃；将步骤(2)中制备的发酵液以体积比为1％的比例接种到MRS液体培养基中；在 温度37℃，转速200rpm，pH6.5，连续发酵16h，即得发酵菌液。

(4)制备菌粉：将发酵菌液8000g用超高速离心机以转速8000rpm/min离心20min； 弃上清液，收集菌泥，在菌泥中加入保护剂，加入量为菌泥重的10％，然后搅拌均匀，冷冻干 燥24h后研成粉末状，，即得乳酸球菌M23菌粉。

进一步，所述保护剂为脱脂奶粉和甘油按比例为5：1的混合物。

本发明之乳酸球菌菌株M23在制备肉鸡日粮中的应用。

进一步，每千克日粮中含10⁹cfu所述乳酸球菌M23。

本发明之乳酸球菌菌粉在制备肉鸡日粮中的应用。