[发明专利]一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌在审
| 申请号： | 201510997621.6 | 申请日： | 2015-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN105400813A | 公开（公告）日： | 2016-03-16 |
| 发明（设计）人： | 刘立明;罗秋玲;刘佳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;C12N9/88;A61K38/51;A61P3/10;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 表达 谷氨酸 脱羧酶 酵母 基因工程 | ||
1.一种高效活性表达人的谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，所述方法是构建以毕赤酵母为宿主表达核苷酸序列如SEQIDNO:1所述的谷氨酸脱羧酶的重组菌，然后以该重组菌发酵生产人的谷氨酸脱羧酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法是将SEQIDNO:1所述的谷氨酸脱羧酶基因GAD65连接到表达载体pPICZα上，得到重组质粒pPICZα-hGAD65，然后电转入毕赤酵母X-33菌株，使GAD65全编码序列插入酵母基因组中，筛选得到重组菌。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵是将重组菌活化后接种于BMGY培养基培养20h，然后静置弃上清，用BMMY培养基重悬菌体并加入甲醇诱导培养。
4.一种毕赤酵母基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以毕赤酵母为宿主表达核苷酸序列如SEQIDNO:1所述的谷氨酸脱羧酶。
5.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌的构建：将SEQIDNO:1所述的谷氨酸脱羧酶基因GAD65连接到表达载体pPICZα上，得到重组质粒pPICZα-hGAD65，然后电转入毕赤酵母X-33菌株，使GAD65全编码序列插入酵母基因组中，筛选得到重组菌。
6.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述宿主是毕赤酵母X-33菌株。
7.权利要求4-6任一所述基因工程菌生产的谷氨酸脱羧酶。
8.权利要求7所述谷氨酸脱羧酶在制备药物方面的应用。
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