[发明专利]EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法

权利要求书

1.一种EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）以从火龙果成熟茎段上培育的单个无菌苗为试材，将试材浸泡在体积浓度为3.71-3.95%的EMS处理液中，使试材与EMS处理液完全接触，处理期间经常摇动，使溶液与无菌苗均匀接触，处理时间为8.26-9.32小时；

2）在步骤1）的处理时间完毕后，用无菌水冲洗5次以上，去除毒性，吸干表面水份，将单株苗接种于继代培养基上恢复生长25-35d，促进其生长分化；

3）在步骤2）中将恢复生长后分化出的不定芽进行HYP逐步筛选，在最大耐受浓度为20mmol/L的HYP的培养基中培养筛选12-18d后，存活的芽继续接入含有20mmol/L的HYP的选择培养基中培养18-25d；再将存活的材料转入不含HYP的培养基中培养18-25d；

4）在步骤3）中最后存活的材料在0-4℃下进行低温诱导7-24d，从而增强火龙果的抗寒性。

2.根据权利要求1所述的EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法，其特征在于：所述的HYP筛选采用多步筛选法，将EMS诱变处理后新增殖的不定芽依次转入含不同浓度的HYP选择培养基上培养15d，以未经EMS处理的芽作为对照；筛选出火龙果对HYP的最大耐受浓度20mmol/L，即为选择压。

3.根据权利要求1所述的EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法，其特征在于：步骤2）中的继代培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+AC0.05%+CCC0.5mg/L。

4.根据权利要求3所述的EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法，其特征在于：步骤3）中采用筛选培养基均为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+AC0.05%+CCC0.5mg/L+HYP20mmol/L；步骤3）中不含HYP的培养基即为步骤2）中的继代培养基。