[发明专利]一种山桐子中脂肪酸和维生素E的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及山桐子中特征成分的检测技术领域，具体的涉及一种山桐子中脂肪酸和维生素E的检测方法。

背景技术

山桐子(Idesia polycarpa Maxim)是大风子科山桐子属落叶乔木，该属在全球仅有1种，主产于日本、朝鲜、俄罗斯远东地区与中国，在我国分布于秦岭、淮河以南各省．山桐子属于木本油料树种，其果实含油量较高，山桐子油为半于性油，经精炼后是优良的食用油，且富含油酸、亚油酸、亚麻酸、棕榈酸等不饱和油料成分，食用不饱和脂肪酸有降低血脂、预防动脉粥状硬化、抗心律失常、保证胎儿大脑发育等作用．山桐子油中还含有可食用的维生素E，具有抗氧化、抗肿瘤、延缓衰老、降低脂质过氧化、预防心脑血管疾病等功效。山桐子中脂肪酸和维生素E的检测对评价山桐子重量具有重要作用，但目前对山桐子研究主要集中在山桐子繁殖研究、栽培技术及山桐子油提取、利用方面，而关于山桐子油中主要特征成分检测报道较少，有关报道均使用GC法或者GC-MS法对山桐子中脂肪酸进行分析，如：陈福民，山桐子脂肪酸提取及成分分析，《江苏科技信息》，2013(16):74-75；吴志文等，不同种源山桐子种子含油率和脂肪酸GC/MS分析，《经济林研究》 2011年02期等，GC或GC/MS法检测之前要进行比较复杂的衍生化，操作中可能会存在衍生不完全，导致检测结果不准确。这是目前采用GC或GC/MS法分析原材料中脂肪酸普遍存在的问题，一篇授权公告号为CN103091406B的专利中公开了油菜花粉中脂肪酸类化合物和/或甾醇类化合物的检测方法，该专利采用HPLC-ELSD法检测油菜花粉中的脂肪酸，检测之间无需衍生化，为油菜花粉中脂肪酸检测提供了更简单、准确的检测手段，但是不同的原料药中需要检测的特征成分不同，检测方法也不相同，如山桐子中的检测的特征成为脂肪酸和维生素E，而且经实践证明，上述油菜花粉中的脂肪酸检测方法并不能有效，准确的检测出山桐子中脂肪酸，特别是维生素E的检测。因此需要一种能解决现有GC或GC/MS法检测山桐子中脂肪酸存在的问题，又能准确，有效的检测出山桐子中脂肪酸和维生素E的方法。

发明内容

本发明旨在解决现有技术中，采用GC或GC/MS法检测山桐子中脂肪酸存在的：检测前要进行比较复杂的衍生化、衍生不完全导致检测结果不准确的问题，提供一种适用于山桐子中脂肪酸和维生素E的检测方法，采用HPLC-ELSD法进行检测，通过严格控制进样溶液的提取、HPLC分离过程及ELSD检测过程，同时检测出山桐子中维生素E和脂肪酸，不需进行柱前衍生，避免了繁琐的前处理，所得结果稳定性好，精密度高，操作简便，实现了通过HPLC-ELSD法来评价山桐子的质量优劣。

为解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现。

一种山桐子中脂肪酸和维生素E的检测方法，其特征在于：所述检测方法为HPLC-ELSD法，所述方法包括下述步骤：

（1）样品溶液的制备：将山桐子提物加入3～15倍甲醇超声溶解，冷却至10～30℃后离心取上清液为样品溶液；

（2）HPLC-ELSD法同时检测步骤（1）中样品溶液中脂肪酸和维生素E的含量，所述HPLC-ELSD法中HPLC的条件为：

色谱柱为：C18；

流动相是：甲醇和稀酸水的混合或乙腈和稀酸水的混合；

流动相流速：0.5-1.5ml/min；

色谱柱柱温为20℃～50℃；

样品溶液进样量：5-20ul；

所述HPLC-ELSD法中ELSD检测器的检测条件为：

漂移管温度：50～80℃；

气流量：2.0～3.5L/min；

采用分流模式，分流比为：1:4～2:3。

在步骤（1）中，所述山桐子提取物采用索氏提取法、超声提取法中的任意一种制备。

在步骤（2）中所述脂肪酸为α-亚麻酸、亚油酸、油酸、棕榈酸、棕榈烯酸和硬脂酸。

在步骤（2）中，在步骤（2）中，所述甲醇和稀酸水的混合或乙腈与稀酸水的混合中，所述甲醇与稀酸水或乙腈与稀酸水在的体积比为 80～100：0～20的体积比混合，所述稀酸水的体积浓度为0.01～0.5 %。

所述甲醇与稀酸水在0～32min时的体积比为80～95:5～20，在33～44min时的体积比为96～100:0～4，所述乙腈与稀酸水在0～39min时的体积比为80～95:5～20，在 40～50min时的体积比为96～100：0～4。

所述稀酸可采用稀酸为三氟乙酸、甲酸和乙酸中的任意一种。