[发明专利]一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药辅料生产技术领域，更确切地，本发明涉及一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法。

背景技术

磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine简称PC），俗名卵磷脂（Lecithin），是天然磷脂的主要成分，许多生理活性均与之相关，一直倍受人们的青睐。磷脂酰胆碱的摄入可显著提高体内乙酰胆碱的浓度，因而它可增强大脑活力、促进神经传导、延缓机体衰老和抗动脉硬化；可促进脂类转换的作用，可以有效防治肝硬化与脂肪肝等功效。另外磷脂酰胆碱在食品工业中可作为良好的乳化剂、抗氧化剂、柔软剂、增湿剂等食品添加剂。

高纯度磷脂酰胆碱是一种天然、安全、高效的乳化剂，可用于输液或静脉注射用乳化剂，是注射剂领域最常用、最安全的乳化剂。同时，磷脂酰胆碱由于其脂质体的特征，可作为抗癌药物和其他缓释药物的载体，显著提高药物的活性、降低毒副作用，与其它药物载体相比具有低毒高效的优点。当磷脂酰胆碱用于注射、脂质体等用途时，对磷脂酰胆碱的纯度、杂质含量、水含量均有严格要求，通常要求磷脂酰胆碱纯度大于95-98%，同时磷脂酰乙醇胺和溶血性磷脂酰胆碱的含量小于1%，水含量低于2%，同时对热原、重金属含量均有限量要求。因此，这些注射级高纯度磷脂酰胆碱的制备技术难度很大。现有的方法通常只能得到较高含量的磷脂酰胆碱，难以获得符合注射剂要求的磷脂酰胆碱。

磷脂酰胆碱广泛存在于大豆、蛋黄等生物组织中，采用适当的提取手段可从这些生物组织中获得混合磷脂。混合磷脂中除了含有磷脂酰胆碱外，还含有如磷脂酰乙醇胺、溶血性磷脂酰胆碱等其他磷脂杂质，需采用适当的手段予以分离纯化。

到目前为止，磷脂的分离方法主要有薄层色谱分离技术、柱层析分离技术、高效液相色谱分离技术、溶剂分离技术等。还有近几年才兴起的超临界CO₂萃取法、半透膜法等。

超临界流体萃取分离效果好，产品质量高，同时可有效避免有毒溶剂的使用，且溶剂耗量少。但由于超临界设备投资昂贵且操作费用高，大规模工业化应用受限。如公开号为CN103288870A，名称为一种注射级高纯度磷脂酰胆碱的制备方法；膜技术由于没有使用化学试剂、节能,吸引了很多化学工程师的研究。目前，虽然膜抗污染的能力已经得到了很好的改善，但处理量小、渗透量和膜的寿命等仍然制约着膜工艺的工业化。如中国专利ZL201010105688.1公开了一种膜分离与柱层析相结合分离磷脂酰胆碱的方法，得到纯度为95%以上的磷脂酰胆碱产品。中国专利ZL200510086600.5公开了一种利用无机陶瓷膜分离制备食品级大豆卵磷脂的方法；柱色谱分离方法设备简单，生产成本低，是目前唯一能够用于大规模生产高纯磷脂的方法，因而成为研究热点。但是，大部分研究停留在分析级制备上，制备过程多选用有毒试剂或混合试剂进行梯度洗脱，这给溶剂回收造成很大困难，并容易造成环境污染。如中国专利ZL200710052284.9、公开了一种乙醇浸取和柱层析相结合的磷脂酰胆碱纯化方法；有机溶剂萃取法一是萃取纯度较低，无法满足注射剂要求，二是用到溶剂种类多，溶剂回收成本高甚至是难以回收，容易造成浪费及环境污染，其工业应用也受到一定限制。中国专利ZL02121550.2、ZL02149601.3和公开了一种采用乙腈和甲醇、乙醇等一元低碳醇的混合溶剂对大豆粉末磷脂进行多级逆流浸取制备磷脂酰胆碱的方法。

发明内容

本发明旨在解决现有技术在制备磷脂酰胆碱过程中存在的：磷脂酰胆碱纯度低，不能满足注射用要求；产品收率低、吸附剂再生困难和溶剂有毒、溶剂难以循环利用，固定相昂贵、样品易发生氧化降解等问题，提供一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法，该方法制备得到的磷脂酰胆碱纯度高，得率高，工艺简单，环保、成本低廉，可大规模生产。

为解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现。

一种注射用磷脂酰胆碱的制备方法，包括以下步骤：

（1）磷脂原料预处理：将磷脂原料溶于有机溶剂，经超声溶解后过滤，得到磷脂原料溶液；过滤时采用过0.45um的微孔滤膜；

（2）将步骤（1）所得的磷脂原料溶液均匀的加入到已用惰性气体置换保护的色谱柱中；磷脂原料溶液采用湿法上样；色谱柱填料装填采用干法装柱，色谱柱装好后向色谱柱中充入惰性气体置换色谱柱中的空气；

（3）待磷脂原料溶液完全吸附到色谱柱填料上，加入有机溶剂进行洗脱，同时向色谱柱中充入惰性气体使色谱柱中的压力为0.1～2MPa；惰性气体的充入能有效合理的控制液体的流出速度在10ml/min~50ml/min；