[发明专利]一种同时检测ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性的引物与方法在审

专利信息
申请号: 201511006897.X 申请日: 2015-12-30
公开(公告)号: CN105524987A 公开(公告)日: 2016-04-27
发明(设计)人: 赵薇薇;胡昌明;梁耀铭;于世辉;燕启江;郭周萍 申请(专利权)人: 广州金域检测科技股份有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京精金石专利代理事务所(普通合伙) 11470 代理人: 刘晔
地址: 510000 广东省广州市国际生物岛*** 国省代码: 广东;44
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 一种 同时 检测 aldh2 基因 adh1b 多态性 引物 方法
【说明书】:

技术领域

本发明属于生物检测技术领域,尤其涉及一种同时检测ALDH2基因*2和ADH1B基 因*2多态性的引物与方法。

背景技术

乙醇脱氢酶(ADH1B基因编码)和乙醛脱氢酶(ALDH2基因编码)是酒精代谢的关键 酶,其突变可影响酒精代谢进而引起乙醛等有害物质的堆积,影响身体健康。ALDH2基因*2 多态性(NM_000690.3:c.1510G>A,p.Glu504Lys)可导致乙醛脱氢酶酶活性显著降低,乙醛 代谢至乙酸速度较慢,ADH1B基因*2多态性(NM_000668.5:c.143A>G,p.His48Arg)可导致 乙醇脱氢酶活性极大增强,乙醇代谢至乙醛的速度较快,促进了体内乙醛的堆积。ALDH2基 因*2和ADH1B基因*2基因多态性均可导致饮酒后体内乙醛堆积,当血液中乙醛达到一定浓 度时,会出现面红、头痛、心动过速、呼吸苦难等不适,表现为对酒精的不耐受性,称为面红 反应。

硝酸甘油是心绞痛急性发作时的常规首选药物,但该药的临床疗效常因人而异。 研究显示,中国汉族人群中,硝酸甘油含服无效的比例高达25%以上,而ALDH2基因*2多态性 与部分国人含服硝酸甘油治疗心绞痛无效相关。硝酸甘油主要的药理作用是通过舒张血 管,降低心脏前后负荷,扩张冠状动脉,减少心肌耗氧,从而缓解心绞痛症状,而其舒张血管 作用主要是通过释放NO所介导的。研究发现,乙醛脱氢酶是使硝酸甘油活化并释放NO的关 键酶,硝酸甘油需先在体内经乙醛脱氢酶生物转化,然后才能释放出有药理活性的一氧化 氮(NO),发挥其抗心绞痛作用。ALDH2基因*2多态性导致乙醛脱氢酶酶活性显著降低,从而 影响了硝酸甘油治疗心绞痛的有效率。

检测ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性对硝酸甘油的临床用药及指导人们健康 饮酒具有重要的意义。中国专利申请201510085568.2公开了一种检测ADH1B基因的单一核 苷多型性R49H的基因型和ALDH2基因的单一核苷多型性E487K的基因型的引物组和定序引 物,但其用于检测ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性准确度不足。现有技术缺少一种检测 特异性和灵敏度高、准确性和精密性好、可实现多个位点同时检测的ALDH2基因*2和ADH1B 基因*2多态性检测引物及其方法。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题,本发明提供一种同时检测ALDH2基因*2和ADH1B基 因*2多态性的引物与方法,具有不发生交叉反应,检测特异性和灵敏度高,准确性和精密性 好等优点,实现了ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性的同时检测。本发明同时检测的位点 包括ALDH2基因*2(NM_000690.3:c.1510G>A,p.Glu504Lys,rs671)以及ADH1B基因*2(NM_ 000668.5:c.143A>G,p.His48Arg,rs1229984)。

本发明提供一种同时检测ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性的引物,包括PCR扩 增引物和SNaPshotPCR引物;所述PCR扩增引物包括:针对ALDH2基因*2的上游引物5’- TGGTGGCTACAAGATGTCG-3’(SEQIDNO.1)和下游引物5’-GCAGGTCCCACACTCACA-3’(SEQID NO.2)以及针对ADH1B基因*2的上游引物5’-CAACACTCTCCACGATGC-3’(SEQIDNO.3)和下 游引物5’-TGAACAGCTTCTCTTTATTCT-3’(SEQIDNO.4);所述SNaPshotPCR引物包括:针对 ALDH2基因*2的SNaPshotPCR引物5’-ACGGGCTGCAGGCATACACT-3’(SEQIDNO.5)以及针对 ADH1B基因*2的SNaPshotPCR引物5’-TTTTAGATGGTGGCTGTAGGAATCTGTC-3’(SEQIDNO.6)。

采用上述技术方案,本发明提供的同时检测ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性的 引物,可以实现ALDH2基因*2和ADH1B基因*2多态性的特异性检测,不发生交叉反应,准确性 好。

优选地,所述PCR扩增引物中,ALDH2基因*2和ADH1B基因*2的引物浓度比为1:1;所 述SNaPshotPCR引物中,ALDH2基因*2和ADH1B基因*2的引物浓度比为1:1。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广州金域检测科技股份有限公司,未经广州金域检测科技股份有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201511006897.X/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top