[发明专利]一种兰科植物种子表面消毒方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种兰科植物种子的表面消毒方法，特别是涉及一种兰科植物种子表面消毒方法。

背景技术

兰科是仅次于菊科的一个大科，是单子叶植物中的第一大科。有悠久的栽培历史和众多的品种。自然界中尚有许多有观赏价值的野生兰花有待开发、保护和利用。兰花是珍贵的观赏植物。据不完全统计，兰科植物约有775属，19500种，广布于热带、亚热带和温带，主要产于南美和亚洲热带。我国有166属1000多种，主要分布在江南各省，以广东、海南、云南和台湾居多。兰科植物是一个特殊的植物类群，是被子植物中最为进化的科之一。同时由于兰科植物品种极多，而不同品种的植物其功能作用也有所差异。如竹叶兰，全草均可入药，具有清热解毒，祛风湿和消炎利尿之功效；又如白芨，用其假鳞茎入药，能消肿、止血、补肺，生肌止痛。润肋行力；还如流苏虾脊兰，能清热解毒，强筋壮骨。此外，像三棱虾瘠兰、绿花勺兰、黑节草、石斛等大部分品种的兰科植物，都是上好的中草药，对某些疾病均有一定疗效。

在我国兰科植物有1200余种被列入重点保护的濒危植物，主要是由于其在自然条件下，种子萌发比较困难，萌发率比较低等导致其无法满足市场的需求，所以现在人们开始大量进行兰科植物的人工栽培，组织培养是多数兰科植物规模化繁殖的主要途径。

在利用组织培养技术培育兰科植物种苗的技术方法中，其种子的表面消毒就是不可缺少的步骤。但兰科植物的种子非常小，一个蒴果中就有几万到上百万粒种子，呈极细小颗粒状或絮状。在组织培养技术中，一般采取先消毒果荚，再剖开果皮取种子的办法。但是当果荚完全成熟开裂时，种子暴露在果荚外面，对其进行表面消毒就变得非常困难；兰科植物种子小且轻，导致常规灭菌操作比较困难。不能对种子进行有效杀菌处理，往往导致组织培养因为染菌而失败。

首先，兰科植物种子细小如粉，同时，质量轻，直接浸泡或离心收集是基本上都浮于酒精或水的上部（图3）；需要包装后才能浸泡或离心（图4）。

此外，授权公告号为CN101352120B，名称为一种植物种子表面消毒方法，其公开了粉尘状植物种子，尤其是兰科植物种子剥开果荚之后，对果荚内的种子进行表面消毒的方法，其包括如下步骤：用消毒液浸泡种子，过滤去除所述消毒液；再用无菌水清洗所述种子，过滤去除残留的所述消毒液和所述无菌水，得到消过毒的种子；并且上述步骤是在离心管内进行，采用琼脂溶液或水将所述消过毒的种子混匀，得到种子悬浮液，再用移液器将所述种子悬浮液从所述离心管中移出。

该种植物种子表面消毒方法，其克服了植物种子因体积小而表面消毒难的困难，实现了对粉尘状植物种子进行直接的表面消毒，摆脱了现有技术中必须消毒果荚的束缚。实验结果表明，该发明消毒方法的效果好，消毒后的种子因污染而萌发失败的比率极低。但是使用上述方法得到的植物种子，其成活率虽然到，但是，并非只要经过消毒液清洗以及无菌水浸泡的种子就能达到后期的百分百的成活率，仍然会有部分种子被感染。此外，成活的兰科植物后期的成活率也不是很高，容易招惹病虫。

另外，现有授权公告号CN101569256B，名称为一种蔺草种子的消毒方法的专利，公开了(1)将蔺草种子用0.6~0.65g/L的高锰酸钾水溶液处理70~75小时，用无菌水冲洗干净；(2)用重量百分比浓度为70~75%的酒精处理55~65分钟，用无菌水冲洗干净；(3)用19~21g/L的漂白粉精片水溶液或重量百分比浓度1~2%的次氯酸钠水溶液处理3~5分钟，用无菌水冲洗干净；(4)用重量百分比浓度为0.1~0.15%的升汞水溶液处理7~9分钟，用无菌水冲洗干净。该发明消毒方法操作简单、消毒彻底，去污力最高可达90%，而且经消毒后的种子萌发率高达80%以上，有力地保证了后续组织培养的成功率，且成本低，适于工业化生产。

蔺草种子也是体积较小，并且质量较轻的种子，未经清洗的种子，成活率较低，可以将其用来清洗兰科植物种子，但是其具体的消毒液且不能直接用来消毒，即使直接用高锰酸钾水溶液也清洗兰科植物种子，后续的处理也不能用漂白粉精片直接清洗。并且对于兰科植物的种子来说，种子萌发率达80%仍然显得较低。

以上方法均没有体现微小种子消毒清洗过程中的收集问题，使得微小种子在清洗过程中难以聚拢，其直接浸泡或离心收集是基本上都浮于酒精或水的上部（图3）；需要包装后才能浸泡或离心（图4），致使其在整个种子表面消毒处理过程中，由于难以收集而造成不必要的损失，减少了消毒处理种子的重量，造成经济损失以及资源浪费。