[发明专利]灯盏花甲素的制备方法

说明书

本发明提供了一种灯盏细辛制备灯盏花甲素的方法，采用醇或者水回流提取，大孔吸附柱层析富集，制备高效液相色谱纯化的工艺流程。具有成本低，易操作，高含量的特点；本发明的方法适用于工业级生物医药用液相制备色谱装置，以实现高纯度灯盏花甲素的工业化生产。

技术领域

本发明涉及植物的提取分离领域，尤其涉及一种从灯盏细辛中得到灯盏花甲素单体的提取方法。

背景技术

5,4’-二羟基黄酮-7-O-D-葡萄糖醛酸又名灯盏花甲素(apigenin-7-O-β-D-glucuronide)，是从菊科植物短葶飞蓬(又名灯盏细辛)[Erigeron breviscapus(Vant.)Hand-Mazz]中提取而得的一种黄酮苷类化合物，灯盏花甲素具有如式I所示结构：

分布于多种天然药用植物体中(如:灯盏细辛(Erigeron breviscapus)、苦碟子(Ixeris sonchifolia)、拳卷地钱(Marchantia convolute)，哥兰叶(Celastrusgemmatus)，多裂委陵菜(Potentilla multifida)牛至(Origanum vulgare)，水飞蓟(silybum marianum)、苦苣菜(Sonchus oleraceus L.)，福寿草(Adonis amurensis)等中。

灯盏细辛(灯盏花)(Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.–Mazz)为菊科飞蓬属草本植物，主要分布于云南省，民间广泛用于治疗中风后遗症、风湿病、胸痹等症，取得了较好效果。植物药提取物灯盏花素(包括灯盏花甲素和乙素，其中主要成分为灯盏花乙素)作为药典中的原料药单独成药，归在2015版药典一部植物油脂和提取物章节。

灯盏花甲素多作为灯盏花乙素(野黄芩苷)的相关物质。而灯盏花甲素的活性也有报道：灯盏花甲素具有明显的抗溃疡的作用和抗急性食管炎及胃炎的作用。对血管性老年痴呆有一定疗效。

灯盏花甲素虽然存在于多种植物中，并且具有一些活性。然而由于其在植物中含量较低，例如灯盏花乙素在灯盏细辛中含量高的可以达到3-4％，而灯盏花甲素的含量就只有0.3-0.5％，所以大量制备比较困难。导致其生物活性等报道也较少。

现有的文献及专利也大多只涉及灯盏花乙素的纯化，而灯盏花甲素作为其中的有关物质成分需要去除。灯盏花甲素的纯化文献报道是用自合成酰胺基化大孔树脂分离，此树脂市面上稀少，仅作为研究使用。且不同丙烯酸甲酯在树脂中的比例也是需要控制的。

发明内容

为了克服现有技术中灯盏花甲素的提取方法存在的缺陷，本发明提出了一种工艺简单、易操作、快速、高效、产品纯度高的芍药苷单体的提取方法。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下。

本发明提供了一种灯盏细辛制备灯盏花甲素的方法，包括如下步骤：

(1)灯盏细辛加入乙醇或水回流提取2-3次，合并提取液，减压浓缩成浸膏；

(2)将灯盏细辛浸膏用浓度为0.1-20％的稀碱溶液溶解至pH 7-10之间，使浸膏溶解后，过滤；滤液加酸调pH值至1-3，静置后过滤；得到沉淀；

(3)将沉淀用碱溶解，调节pH值6-9之间，上苯乙烯型大孔树脂层析柱，用水冲洗，分别接收洗脱液，以液相检测，收集灯盏花甲素相对含量大于60％及以上的馏分。将含有灯盏花甲素的洗脱液部分减压浓缩成清膏；

(4)将含有灯盏花甲素的清膏上制备液相柱，以有机溶剂和含有酸的水作为流动相，进行纯化分离，收集灯盏花甲素纯品，检测波长为：270-335nm，收集保留时间在10分钟以后的馏分，该馏分为灯盏花甲素纯品。