[发明专利]一种南瓜蛋白肽生产工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种南瓜籽粕蛋白酶解制备低分子肽的方法。

背景技术

南瓜籽中油脂含量为35~50%，南瓜籽提油后的副产物南瓜籽粕中含有人体必需 的17种氨基酸，营养丰富，经测定约含41%的粗蛋白。按照冷榨工艺，每生产1t南瓜籽油可以 得到南瓜籽蛋白粉1t，如果在制油的同时将南瓜蛋白进行开发利用，无疑将极大地促进南 瓜资源的开发与利用。但目前南瓜籽粕一般只被当作工业废料处理或用做普通饲料的添加 物。将南瓜籽粕直接加工为食品或作为食品成分，由于其颜色和味道等性状较为特殊，难以 获得理想的食用效果。若用酶法将其降解为小分子肽，则可大大提高其在食品中的理化性 能，并可能获得其前体没有的生理活性。因此，将南瓜籽粕进行酶解处理具有较大的实用价 值和应用前景。植物蛋白水解率一般较动物蛋白低，采用单酶水解较难获得足够短肽。木瓜 蛋白酶与中性蛋白酶适宜pH和温度范围较为接近，水解位点也具有一定互补性，因此生产 和研究中两者多复配使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种南瓜蛋白肽生产工艺，以南瓜籽粕蛋白为底物，木瓜蛋 白酶和AS1398蛋白酶双酶为水解酶，采用木瓜蛋白酶与中性蛋白酶同加的方法来研究南瓜 籽粕蛋白酶解制备短肽的过程。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种南瓜蛋白肽生产工艺，包括如下步骤：

一、将脱脂南瓜籽粕粉碎，过筛，然后与水混合置于100℃恒温水浴中加热5～20min，然 后冷却至室温，得到浓度为20～40mg/mL的南瓜籽粕粉蛋白溶液；

二、向南瓜籽粕粉蛋白溶液中加入木瓜蛋白酶和枯草芽孢杆菌AS1398蛋白酶进行恒温 酶解，控制酶解温度为40～55℃，时间为1～6h，pH6.5～7.5，加酶量为15～25%，木瓜蛋白酶 和枯草芽孢杆菌AS1398蛋白酶的质量比为1：1；

三、达到反应预定时间后，将南瓜籽粕蛋白酶解液加热升温至100℃，保温5～20min使 酶活力丧失。

本发明具有如下优点：

1、脱脂南瓜籽粕蛋白质含量丰富，占总质量41%，是较好的植物蛋白来源。水解后气味 芬芳，溶解性大为增强，可以作为合适的食品添加物。

2、利用木瓜蛋白酶与AS1398蛋白酶协同水解南瓜籽粕蛋白制取低分子肽的方法 是可行的，南瓜籽粕蛋白在100℃下加热预处理10min水解效果较佳。

3、木瓜蛋白酶和AS1398蛋白酶双酶水解南瓜籽粕蛋白的最佳条件为:加酶量19%， 底物浓度35mg/mL，温度50℃，pH7.0，双酶质量比1：1，水解时间3h。加酶量、底物质量浓度、 温度为重要影响因素。

4、水解过程中水解液表层出现少量油状物，对榨油与南瓜蛋白综合利用的工艺偶 联研究有一定启发意义。

附图说明

图1为预处理时间对水解度的影响；

图2为水解时间对水解度的影响。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本 发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖 在本发明的保护范围中。

本发明提供了一种南瓜蛋白肽生产工艺，具体内容如下：

1材料与方法

1.1材料、试剂

脱脂南瓜籽粕；木瓜蛋白酶：食品级，酶活力100万U/g，购自无锡雪梅酶制剂科技有限 公司；枯草芽孢杆菌AS1398中性蛋白酶：酶活力5万U/g，购自无锡雪梅酶制剂科技有限公 司。

1.2仪器、设备

紫外可见分光光度计，离心分离机，pH酸度计，凯氏定氮仪，增力电动搅拌器，电热恒温 水浴锅，恒温干燥箱，九阳料理机，微量滴定管,电子分析天平等。

1.3试验方法

1.3.1总氮含量测定（微量凯氏定氮法）

1.3.2水解度（DH）测定：水解度=游离氨基氮/总氮×100%。游离氨基氮的测定方法用 甲醛滴定法。

1.3.3总糖含量测定（苯酚硫酸法）。

1.3.4南瓜籽粕蛋白的酶解工艺：南瓜籽粕→粉碎→过筛→调底物质量浓度→预 处理→调温度→调pH→加酶→水解→灭酶→产物。