[发明专利]一种17α-羟孕酮的化学发光检测试剂盒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种17α-羟孕酮的化学发光检测试剂盒，所述试剂盒包括组分A和组分 B，所述组分A为17α-羟孕酮抗原衍生物包被的磁球悬浮液，所述17α-羟孕酮 抗原衍生物由17α-羟孕酮抗原与蛋白载体偶联而成，所述组分B为标记17α-羟孕 酮抗体的化学发光标记物溶液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述蛋白载体选自牛血清白 蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白、血蓝蛋白、牛IgG、人IgG、卵清蛋白、 肌红蛋白和甲状腺球蛋白中的任一种。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物选自鲁 米诺及其衍生物、异鲁米诺及其衍生物、吖啶酯中的任一种。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为N-(4- 氨丁基)-N-乙基异鲁米诺。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述磁球为经过表面修饰使 其表面带有活性基团的磁性微粒，并具有0.5-5μm的粒径。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述活性基团与所述蛋白载 体偶联。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述活性基团选自下列组中 的至少一种：巯基、羟基、羧基、氨基、环氧基、醛基、异氰酸酯基、氰酸酯基、 氰基、异氰基、马来酰亚胺基、N-羟基琥珀酰亚胺酯基、酚羟基，以及其衍生基 团。

8.根据权利要求1至7任一项所述的试剂盒，其特征在于，

所述化学发光标记物直接或间接标记所述17α-羟孕酮抗体，所述间接标记的 方式包括通过异硫氰酸荧光素与抗异硫氰酸荧光素抗体体系或链霉亲和素与生 物素体系间接标记所述17α-羟孕酮抗体。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括选自B1-B3 中的任意一种组分，其中

B1为直接标记化学发光标记物的17α-羟孕酮抗体溶液；

B2为标记化学发光标记物的链霉亲和素溶液和生物素化的17α-羟孕酮抗体 溶液；

B3为标记化学发光标记物的抗异硫氰酸荧光素抗体溶液和标记异硫氰酸荧 光素的17α-羟孕酮抗体溶液。

10.根据权利要求1至7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述17α-羟孕 酮抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。

11.根据权利要求1至7任一项所述的试剂盒，其特征在于，在所述试剂盒 中，17α-羟孕酮抗原的浓度为5-200ng/ml，蛋白载体的浓度为2-50μg/ml，17α- 羟孕酮抗体的浓度为0.01-1μg/ml；磁球的浓度为0.1-10mg/ml；化学发光标记物 的浓度为0.2-1mg/l。

12.根据权利要求1至7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还 包括底物1和底物2，所述底物1为含有血红素衍生物的碱性溶液，底物2为含 有过氧化氢的溶液。

13.根据权利要求1至7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还 包括17α-羟孕酮抗原的低点校准品和高点校准品，并任选地包括缓冲液。

14.一种如权利要求1-13中任一项所述的17α-羟孕酮的化学发光检测试剂盒 的制备方法，包括使用所述17α-羟孕酮抗原与蛋白载体形成的衍生物包被磁球。

15.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述方法还包括在包被 磁球之前，使用第一活化剂将磁球进行活化处理，将经所述活化处理后的磁球分 散于缓冲液中，并加入17α-羟孕酮抗原与蛋白载体形成的17α-羟孕酮抗原衍生物 进行反应，经固液分离，清洗固体，得到所述磁球与所述衍生物形成的分散体系； 其中，所述第一活化剂为N，N-二环己基碳二亚胺和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基 碳二亚胺盐酸盐中的至少一种或其与N-羟基琥珀酰亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺磺 酸钠盐中的至少一种的混合物。