[发明专利]一种美国红枫的组培快繁方法有效
申请号: | 201511026125.2 | 申请日: | 2015-12-30 |
公开(公告)号: | CN105454048B | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 李飞;赵玲 | 申请(专利权)人: | 四川七彩林业开发有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 635600 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 美国 组培快繁 方法 | ||
1.一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)外植体选取及灭菌:切取美国红枫带芽茎段,采用酒精和升汞灭菌处理;
(2)启动培养:将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周,腋芽生成,所述启动培养基的组成为:MS基本培养基,补充0.1—2.0mg/LPVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂,所述启动培养基的pH值为5.8—6.2;
(3)增殖培养:切取步骤(2)所得腋芽,接种到增殖培养基中培养3—5周,丛生芽生成,所述增殖培养基的组成为:WPM基本培养基,补充0.01—0.5mg/L6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂;
(4)生根培养:将步骤(3)所得丛生芽分离成单株,接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗,所述生根培养基的组成为:1/2MS基本培养基,补充0.05—0.5mg/LNAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂;
所述启动培养、增殖培养、生根培养步骤中,培养温度为23—27℃,光照强度为2000—2500Lx,所述启动培养的光周期为14/12h,所述增殖培养和所述生根培养的光周期为16/8h;
在步骤(2)启动培养中,切取所述外植体带芽茎段上部的可用茎段,重新接种到所述启动培养基中培养,直至腋芽生成,将所述腋芽切下供步骤(3)增殖培养,循环2—3次。
2.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述外植体选取及灭菌的具体操作为:选取美国红枫幼嫩枝条,去掉叶片,在洗涤液中浸泡5—15min,然后在流水中冲洗20—35min;在无菌操作台上,用75%的酒精处理25—40s,无菌水冲洗2—4次,再用0.1%的升汞处理4—8min,无菌水冲洗5—7次,晾干,切割成长度为1—2cm的带芽茎段即可。
3.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述启动培养基补充的PVP为0.5—2.0mg/LPVP。
4.根据权利要求3所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述启动培养基补充的PVP为1.0mg/LPVP。
5.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述增殖培养基补充的6-BA为0.05—0.5mg/L6-BA。
6.根据权利要求5所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述增殖培养基补充的6-BA为0.1mg/L6-BA。
7.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述生根培养基补充的NAA为0.1—0.5mg/LNAA。
8.根据权利要求7所述的一种美国红枫的组培快繁方法,其特征在于:所述生根培养基补充的NAA为0.2mg/LNAA。
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