[发明专利]一种美国红枫的组培快繁方法

说明书

本发明公开一种美国红枫的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：切取美国红枫带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理；(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周，腋芽生成；(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成；(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗；所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，成活率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。

技术领域

本发明涉及生物组培育苗技术领域，具体涉及一种美国红枫的组培快繁方法。

背景技术

美国红枫，槭树科槭属，原产于美国东北部，为大型乔木，树型圆形，整洁优美，是美国最受欢迎的绿化树种。前几年，自其被引入国内之后，已成为园林绿化的新宠，因此，关于美国红枫的研究也逐渐增多。目前主要通过播种和嫁接繁殖，但出芽率和成活率都不是很高，繁殖系数低，繁殖周期长，场地要求大，人工成本较高，远不能满足国内对种苗的需求。

近几年，国内对于美国红枫组培快繁技术的研究也取得了一定成果，然而该方法尚不完善，繁殖时间较长，成活率不高，材料成本较高成为制约美国红枫组培快繁技术发展的瓶颈，因此，如何提高其生产效率，缩短培育时间，降低人工成本，保持优良树种的遗传稳定性，提高其繁殖系数成为目前亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种美国红枫的组培快繁方法，所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，成活率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。

为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是一种美国红枫的组培快繁方法，包括以下步骤：

(1)外植体选取及灭菌：切取美国红枫带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理；

(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周，腋芽生成，所述启动培养基的组成包括：MS基本培养基，补充0.1—2.0mg/L PVP，所述启动培养基的pH值为5.8—6.2；

(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成，所述增殖培养基的组成包括：WPM基本培养基，补充0.01—0.5mg/L 6-BA；

(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充0.05—0.5mg/L NAA；

在步骤(2)启动培养中，切取所述外植体带芽茎段上部的可用茎段，重新接种到所述启动培养基中培养，直至腋芽生成，将所述腋芽切下供步骤(3)增殖培养，循环2—3次。

在启动培养过程中，外植体带芽茎段生长，此时可将带芽茎段的上部分带芽的部分再次切取下来，重新作为外植体接种到启动培养基上，15—25天时，在原芽周围又会分化出1—3个1—3cm的腋芽，可切下供增殖培养所用，这样每次带芽茎段和启动培养基可用2—3次，采用此方法循环重复利用，可提高材料利用率，加快繁殖速率。

优选的，所述外植体选取及灭菌的具体操作为：选取美国红枫幼嫩枝条，去掉叶片，在洗涤液中浸泡5—15min，然后在流水中冲洗20—35min；在无菌操作台上，用75％的酒精处理25—40s，无菌水冲洗2—4次，再用0.1％的升汞处理4—8min，无菌水冲洗5—7次，晾干，切割成长度为1—2cm的带芽茎段即可。

优选的，所述启动培养基的组成包括：MS基本培养基，补充0.5—2.0mg/L PVP。