[发明专利]HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针及其制备方法和试剂盒

权利要求书

1.一种HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)选取针对HER-2基因的BAC克隆为RP11-1021P11、RP11-62N23、RP11-1044P23中至少 一种，或选取BAC克隆为RP11-98J2、RP11-1065L22、CTD-2327I15中的至少一种；和/或选取 针对TOP2A基因的BAC克隆为RP11-1152A10、CTD-3217C5中至少一种，或选取BAC克隆为 RP11-737D6、CTD-3087O22、RP11-48O10、CTD-2134K5中的至少一种；

(2)对BAC克隆分别提取质粒，得到质粒DNA，定量；

(3)用荧光素标记质粒DNA，针对同一种基因的质粒DNA所标记的荧光素相同，且针对 HER-2基因和/或针对TOP2A基因的检测探针标记的荧光素的颜色不相同，即得。

2.根据权利要求1所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特征在于， 针对HER-2基因的BAC克隆为RP11-1021P11、RP11-62N23和RP11-1044P23，或为BAC克隆为 RP11-98J2、RP11-1065L22和CTD-2327I15。

3.根据权利要求1所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特征在于， 针对TOP2A基因的所述BAC克隆为RP11-1152A10和CTD-3217C5，或针对TOP2A基因的所述BAC 克隆为RP11-737D6、CTD-3087O22、RP11-48O10、和CTD-2134K5。

4.根据权利要求1所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特征在于， 针对HER-2基因的BAC克隆为RP11-1021P11、RP11-62N23和RP11-1044P23，以及针对TOP2A基 因的所述BAC克隆为RP11-1152A10和CTD-3217C5。

5.根据权利要求1所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特征在于， 针对HER-2基因的BAC克隆为BAC克隆为RP11-98J2、RP11-1065L22和CTD-2327I15，以及针对 TOP2A基因的所述BAC克隆为RP11-737D6、CTD-3087O22、RP11-48O10、和CTD-2134K5。

6.根据权利要求1所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特征在于， 所述荧光素为AlexaFITC、AlexaRhodamine、TexasRed、 DEAC。

7.根据权利要求1-6任一项所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针的制备方法，其特 征在于，步骤(3)采用随机引物法或切口平移法对质粒DNA进行荧光素标记，所述标记的温 度为24℃-26℃，时间为4-6小时。

8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法得到的HER-2基因和/或TOP2A基因检测探 针。

9.一种HER-2基因和/或TOP2A基因检测试剂盒，其特征在于，包括有权利要求8所述的 HER-2基因和/或TOP2A基因检测探针。

10.根据权利要求9所述HER-2基因和/或TOP2A基因检测试剂盒，其特征在于，还包括有 用于内控的17号染色体鉴别探针，该鉴别探针与HER-2基因和TOP2A基因检测探针标记的荧 光素的颜色不相同；还包括有用于封闭重复序列的COTHumanDNA，和DAPI复染剂。