[发明专利]一种改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质的检测方法

权利要求书

1.一种改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质的检测方法，其特征在于，所 述检测方法为：

步骤一、待测样品经C₁₈固相萃取柱纯化，收集洗脱液A；

步骤二、所述洗脱液A经季胺固相萃取柱纯化后，先用去离子水和甲醇 冲洗，收集洗脱液B；继续用含1％HCl的甲醇溶液冲洗，收集洗脱液C；

步骤三、所述洗脱液B经羧酸固相萃取柱纯化，先用去离子水和甲醇淋 洗，弃去流出液；继续用5％的氨水甲醇溶液冲洗，收集洗脱液D；

步骤四、合并所述洗脱液C和所述洗脱液D，水浴氮气吹干，甲醇定容 后，微孔滤膜过滤，得待测品。

步骤五、所述待测品通过高效液相色谱-三重四级杆方法进行定性检测和/ 或定量检测。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述C₁₈固相萃取柱 的基质为硅胶-Si(CH₃)C₁₈H₃₇，所述C₁₈固相萃取柱的粒径为40-63μm，所述 C₁₈固相萃取柱的孔径为所述C₁₈固相萃取柱的含碳量11％。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述季胺固相萃取柱 的基质为键合有三甲基氨丙基的高纯硅胶，所述季胺固相萃取柱的粒径为 40～63nm，所述季胺固相萃取柱的孔径为所述季胺固相萃取柱的孔体积 为0.8cm³/g，所述季胺固相萃取柱的比表面积为480m²/g，所述季胺固相萃取 柱的离子交换容量为1.1meq/g。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述羧酸固相萃取柱 的基质为N-乙基吡咯烷酮-二乙烯基苯共聚物，所述羧酸固相萃取柱粒径为 40～63μm，所述羧酸固相萃取柱的平均孔径为所述羧酸固相萃取柱的离 子交换容量为1.4meq/g。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述水浴温度为40℃， 所述微孔滤膜为0.22μm微孔滤膜。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述定性检测和/或定 量检测的对照品为0.1mg/ml的伪伐地那非、羟基豪莫西地那非、豪莫西地那 非、硫代艾地那非、那红地那非、那莫西地那非、盐酸育亨宾、氨基他达拉 非、红地那非、西地那非、伐地那非、他达那非、巯基西地那非、去乙基伐 地那非、N-去甲基西地那非、二甲基西地那非、格列齐特、二乙氨基他达拉 非、羟基伐地那非和甲磺酸酚妥拉明的甲醇溶液中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述的检测方法。其特征在于，所述待测品的定性检 测和/或定量检测采用梯度洗脱方法，所述梯度洗脱的流动相为体积浓度0.1％ 的甲酸水溶液和体积浓度0.1％的甲酸乙腈溶液的中的一种或二者的混合溶 液；

进样0～5min时，流动相1的配比为90％所述甲酸水溶液和10％所述甲酸 乙腈溶液的混合溶液；

进样5～7.5min时，流动相2为所述乙酸乙腈溶液；

进样7.5min后，流动相3的配比为90％所述甲酸水溶液和10％所述甲酸 乙腈溶液的混合溶液。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测品的定性检 测和/或定量检测采用电喷雾离子源，正离子模式进行检测；

电喷雾电压为5.5KV，离子源温度为550℃；脱溶剂气为N₂，所述脱溶 剂气的气流压力为50psi；锥孔反吹气为N₂，所述锥孔反吹气的气流压力为 35psi；碰撞气为N₂；扫描模式为多反应监测模式。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括 预处理步骤，所述预处理在步骤一前进行：

所述预处理的方法为：待测样品依次经粉碎、醇提后过滤，收集上清液， 所述上清液减压浓缩后，静置，静置产物中滴加醇溶液，离心取上清液，减 压浓缩，静置即得。

10.一种包括权利要求1至9任意一项所述的检测方法在改善阳虚和/或 缓解疲劳类化学物质的定性检测和/或定量检测中的应用。