[发明专利]一种改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于食品、药品或保健品分析领域，尤其涉及一种改善阳虚和/或 缓解疲劳类化学物质的检测方法。

背景技术

随着现代社会生活压力的逐渐增大，越来越多的人面临性欲减弱、易疲 劳的困扰，因此，改善阳虚、缓解疲劳类保健食品及中成药的市场需求日益 增长。然而，某些不法厂商为了壮阳、缓解疲劳功效、牟取暴利，在改善阳 虚、缓解疲劳的保健食品及中成药中非法添加壮阳和缓解疲劳的西药。消费 者长期服用含有壮阳或缓解疲劳类药物的保健食品或中成药，会严重营养身 体健康。

现有技术中，常见的检测手段主要包括：薄层色谱法、高效液相色谱(HPLC) 法、高效液相色谱一质谱/质谱(HPLC—MS/MS)法、气相色谱氮磷检测法和 气相色谱一质谱(GC—MS)法，但此类检测手段多见于某一类药物在尿样或血 样中的分析，在未见有系统的、多类化学成分的研究方法，尤其是壮阳、缓 解疲劳保健食品和中成药中的检测方法报道。由于前处理方法及分析方法的 局限性，大多数研究只是检测壮阳类中的某一种或者某几种化学成分。综上 所述，现有技术中，并未能对于壮阳和/或缓解疲劳类化学物质进行多指标完 整的检测，且上述检测手段还具有成本高、检测时间长以及工作效率低的缺 点。

因此，研发出一种改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质的多指标快速检测 方法，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明提供了一种改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质的检测方法，用于 解决现有技术中，并未能对于改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质进行多指标 完整的检测的问题。同时，本发明提供的检测方法还可以解决现有技术中且 成本高、检测时间长以及工作效率低的缺点。

本发明提供的一种改善阳虚和/或缓解疲劳类化学物质的检测方法，为： 步骤一、待测样品经C₁₈固相萃取柱纯化，收集洗脱液A；步骤二、所述洗脱 液A经季胺固相萃取柱纯化后，先用去离子水和甲醇冲洗，收集洗脱液B； 继续用含1％HCl的甲醇溶液冲洗，收集洗脱液C；步骤三、所述洗脱液B经 羧酸固相萃取柱纯化，先用去离子水和甲醇淋洗，弃去流出液；继续用5％的 氨水甲醇溶液冲洗，收集洗脱液D；步骤四、合并所述洗脱液C和所述洗脱 液D，水浴氮气吹干，甲醇定容后，微孔滤膜过滤，得待测品；步骤五、所 述待测品通过高效液相色谱-三重四级杆方法进行定性检测和/或定量检测。

优选地，所述C18固相萃取柱的基质为硅胶-Si(CH3)C18H37，所述C18固相萃取柱的粒径为40-63μm，所述C18固相萃取柱的孔径为60，所述C18固相萃取柱的含碳量11％。

优选地，所述季胺固相萃取柱的基质为键合有三甲基氨丙基的高纯硅胶，所述季胺固相萃取柱的粒径为40～63nm，所述季胺固相萃取柱的孔径为60，所述季胺固相萃取柱的孔体积为0.8cm3/g，所述季胺固相萃取柱的比表面积为480m2/g，所述季胺固相萃取柱的离子交换容量为1.1meq/g。

优选地，所述羧酸固相萃取柱的基质为N-乙基吡咯烷酮-二乙烯基苯共聚物，所述羧酸固相萃取柱粒径为40～63μm，所述羧酸固相萃取柱的平均孔径为70，所述羧酸固相萃取柱的离子交换容量为1.4meq/g。

优选地，所述水浴温度为40℃，所述微孔滤膜为0.22μm微孔滤膜。

优选地，所述定性检测和/或定量检测的对照品为0.1mg/ml的伪伐地那非、 羟基豪莫西地那非、豪莫西地那非、硫代艾地那非、那红地那非、那莫西地 那非、盐酸育亨宾、氨基他达拉非、红地那非、西地那非、伐地那非、他达 那非、巯基西地那非、去乙基伐地那非、N-去甲基西地那非、二甲基西地那 非、格列齐特、二乙氨基他达拉非、羟基伐地那非和甲磺酸酚妥拉明的甲醇 溶液中的一种或多种。

优选地，所述待测品的定性检测和/或定量检测采用梯度洗脱方法，所述 梯度洗脱的流动相为体积浓度0.1％的甲酸水溶液和体积浓度0.1％的甲酸乙 腈溶液的中的一种或二者的混合溶液；进样0～5min时，流动相1的配比为90％ 所述甲酸水溶液和10％所述甲酸乙腈溶液的混合溶液；进样5～7.5min时，流 动相2为所述乙酸乙腈溶液；进样7.5min后，流动相3的配比为90％所述甲 酸水溶液和10％所述甲酸乙腈溶液的混合溶液。