[发明专利]BCR基因和ABL基因检测探针及其制备方法和试剂盒在审
申请号: | 201511033447.X | 申请日: | 2015-12-30 |
公开(公告)号: | CN105483256A | 公开(公告)日: | 2016-04-13 |
发明(设计)人: | 何瑰;陈绍宇;张会清 | 申请(专利权)人: | 广州安必平医药科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510665 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | bcr 基因 abl 检测 探针 及其 制备 方法 试剂盒 | ||
1.一种BCR基因和ABL基因检测探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)选取针对BCR基因的BAC克隆为RP11-1026A5、RP11-165G5、CTD-2079I4中至少一种, 和选取BAC克隆为CTD-2302P22、CTD-2037J11、CTD-2509L4中的至少一种;和选取针对ABL基 因的BAC克隆为CTD-2037L19、RP11-21G10、CTD-2526G20中至少一种;
(2)对克隆分别提取质粒,得到质粒DNA,定量;
(3)用荧光素标记质粒DNA,针对BCR基因和针对ABL基因的质粒DNA标记的荧光素的颜 色不相同,且针对BCR基因中,来源于BAC克隆RP11-1026A5、RP11-165G5、CTD-2079I4的质粒 DNA与来源于BAC克隆CTD-2302P22、CTD-2037J11、CTD-2509L4的质粒DNA的荧光素的颜色不 相同,即得。
2.根据权利要求1所述的BCR基因和ABL基因检测探针的制备方法,其特征在于,针对 ABL基因的所述BAC克隆为CTD-2037L19、RP11-21G10、和CTD-2526G20。
3.根据权利要求1所述的BCR基因和ABL基因检测探针的制备方法,其特征在于,针对 BCR基因的BAC克隆为RP11-1026A5、RP11-165G5、和CTD-2079I4,和为BAC克隆为CTD- 2302P22、CTD-2037J11、和CTD-2509L4。
4.根据权利要求1所述的BCR基因和ABL基因检测探针的制备方法,其特征在于,所述荧 光素为FITC、Rhodamine、TexasRed、 或DEAC。
5.根据权利要求1-4任一项所述BCR基因和ABL基因检测探针的制备方法,其特征在于, 步骤(3)采用随机引物法或切口平移法对质粒DNA进行荧光素标记,所述标记的温度为15 ℃-18℃,标记的时间为8-12小时。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法得到的BCR基因和ABL基因检测探针。
7.一种BCR基因和ABL基因检测试剂盒,其特征在于,包括有权利要求6所述的BCR基因 和ABL基因检测探针。
8.根据权利要求7所述的BCR基因和ABL基因检测试剂盒,其特征在于,还包括有用于封 闭重复序列的COTHumanDNA,和DAPI复染剂。
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