[发明专利]一种可刺激T细胞扩增的组合物

权利要求书

1.一种可刺激CD8+T细胞体外扩增的组合物，其活性因子由Anti-CD3抗体、Anti-CD28 抗体、IL-2、IL-7和IL-21共5种细胞因子组成。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：各因子的使用终浓度分别为：Anti-CD3 抗体终浓度0.8～1.2μg/mL、Anti-CD28抗体终浓度0.8～1.2μg/mL、IL-2终浓度8～12ng/ mL、IL-7终浓度8～12ng/mL、IL-21终浓度18～22ng/mL。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：各因子的使用终浓度分别为：Anti-CD3 抗体终浓度1μg/mL、Anti-CD28抗体终浓度1μg/mL、IL-2终浓度10ng/mL、IL-7终浓度10ng/ mL、IL-21终浓度20ng/mL。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的组合物，其特征在于：该组合物为CD8⁺T细胞培养 基。

5.一种体外扩增CD8+T细胞的方法，包括如下步骤：

1)收集HIV-1感染患者的外周血单个核细胞PBMC经刺激产生的CD8⁺T细胞；

2)将收集的CD8⁺T细胞悬浮培养于培养基中，待细胞广泛激活后加入活性因子Anti-CD3 抗体、Anti-CD28抗体和IL-2，继续培养至少24h后，继续加入IL-2、IL-7和IL-21中的至少一 种细胞因子，继续培养，扩增CD8⁺T细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：使用IL-2和HIV-1抗原多肽组合来刺激 PBMC产生CD8⁺T细胞。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：HIV-1抗原多肽组合为已突变或未突变 HIV-1抗原多肽组合，其中，已突变HIV-1抗原多肽组合为：SL9:SLYNTVATL、IL9: ILKEPVHGV、RY9:RYLRDQQLL、TW10:TSTLQEQIGW和LY9:LYNTVATLY；未突变HIV-1抗原多肽 组合为：WF9:WASRELERF、TV9:TLNAWVKVV、TL9:TPQDLNTML、EW10:ETINEEAAEW、GL9: GPGHKARVL和KF11:KAFSPEVIPMF。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：将收集的CD8⁺T细胞悬浮培养于培养基中 7d后，活性因子Anti-CD3抗体、Anti-CD28抗体和IL-2。

9.根据权利要求5或8所述的方法，其特征在于：加入活性因子Anti-CD3抗体、Anti- CD28抗体和IL-2后继续培养48h后，加入IL-2、IL-7和IL-21继续培养，扩增CD8⁺T细胞。

10.根据权利要求5或8所述的方法，其特征在于：Anti-CD3抗体添加的终浓度为1μg/ mL、Anti-CD28抗体添加的终浓度为1μg/mL、IL-2添加的终浓度为10ng/mL、IL-7添加的终 浓度为10ng/mL、IL-21添加的终浓度为20ng/mL。