[发明专利]浸染条蛋白质印迹法有效
申请号: | 201580001054.2 | 申请日: | 2015-03-11 |
公开(公告)号: | CN105358236B | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
发明(设计)人: | W·斯特朗 | 申请(专利权)人: | 生物辐射实验室股份有限公司 |
主分类号: | B01D57/02 | 分类号: | B01D57/02;C02F1/40 |
代理公司: | 31100 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 杨昀;陶家蓉<国际申请>=PCT/US2 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 浸染 蛋白质 印迹 | ||
1.分离和检测样品中分析物的方法,所述方法包括:
将样品施加于分离介质,其中所述分离介质是聚丙烯酰胺凝胶;
令所述样品中的所述分析物在所述分离介质中沿分离轴分离,并产生所述分析物的分布;
令所述分析物固定在埋于所述分离介质中的部分浸染条上,其中所述分析物的分布为使得浸染条或其长形部分与分离轴平行对齐,其中所述固定在浸染条上的分析物的分布保持分离介质中发生的分析物的分布;
从所述分离介质取出所述浸染条;并
检测固定在该取出的浸染条上的所述分析物。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,样品中分析物的分离包括进行电泳、电渗或等电点聚焦。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述分离介质包含在平板、管、盒、片、毛细结构、梳状物、微型卡或微流芯片样形式的凝胶。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分离介质包括聚丙烯酰胺、聚丙烯酰胺-二-丙烯酰胺或N,N-聚二甲基丙烯酰胺。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分离介质包含变性剂。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分离介质包含流体通道,且令样品中的分析物分离包括使所述样品流过所述流体通道。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述分析物共价连接于所述浸染条。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述分析物与所述浸染条交联。
9.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述分析物非共价连接于所述浸染条。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述分析物结合于亲和结构物。
11.如权利要求10所述的方法,其特征在于,所述亲和结构物包括:抗体、酶、蛋白质、肽、适体、配体、核酸、核苷酸、核酸类似物、配位复合物、天然或合成聚合物、碳水化合物或小分子。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述分析物是蛋白质,所述亲和结构物包含抗体。
13.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述分析物沉积到与所述浸染条偶联的膜上。
14.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述膜包含硝基纤维素或聚偏氟乙烯。
15.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,所述分析物通过吸附、静电相互作用、离子相互作用或疏水相互作用固定在所述浸染条上。
16.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述浸染条暴露于光、热或改变的化学环境。
17.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,令分析物固定在浸染条上包括使所述浸染条接触固定试剂。
18.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,所述分析物非特异性固定于所述浸染条。
19.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,所述浸染条包含电极,且令分析物固定在所述浸染条上包括向所述电极供电。
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