[发明专利]作为对抗肠病毒感染之免疫原的病毒颗粒及其制造

权利要求书

1.一种制造对抗肠病毒感染的免疫原的方法，其特征在于

(a)将克沙奇病毒A6(CVA6)病毒颗粒感染人胚肾293(HEK293)细胞，于人胚肾293(HEK293)细胞之第一培养物中生成克沙奇病毒A6(CVA6)病毒颗粒，并从该第一培养物中，收集该CVA6病毒颗粒；或

(b)将克沙奇病毒A10(CVA10)病毒颗粒感染人胚肾293(HEK293)细胞，于人胚肾293(HEK293)细胞之第二培养物中生成克沙奇病毒A10(CVA10)病毒颗粒，并从该第二培养物中，收集该CVA10病毒颗粒；或

(c)同时进行步骤(a)及(b)。

2.如权利要求1所述的方法，其中CVA6病毒颗粒及CVA10病毒颗粒结合以形成一多价免疫组合物。

3.如权利要求1所述的方法，其中CVA6病毒颗粒、或CVA10病毒颗粒、或两者与除了CVA6及CVA10以外的肠病毒A型之病毒颗粒结合，以形成多价免疫组合物，其中除了CVA6及CVA10以外的肠病毒A型是选自由CVA16、及EV71、及其组合所组成之群组。

4.如权利要求3所述的方法，其中CVA6病毒颗粒及CVA10病毒颗粒与CVA16病毒颗粒及/或EV71病毒颗粒结合，以形成多价免疫组合物。

5.如权利要求3所述的方法，其中CVA6病毒颗粒及CVA10病毒颗粒与CVA16病毒颗粒及EV71病毒颗粒结合，以形成多价免疫组合物。

6.如权利要求3所述的方法，其中除了CVA6及CVA10以外的肠病毒A型之病毒颗粒是从HEK293细胞之第三培养物中生成及收集而得。

7.如权利要求1所述的方法，其中该CVA6或CVA10病毒颗粒可进一步纯化、或去活化、或两者兼具。

8.如权利要求7所述的方法，其中该纯化是藉由蔗糖梯度分层超速离心施行。

9.如权利要求7所述的方法，其中该去活化是以福尔马林处理施行。

10.如权利要求6所述的方法，其中除了CVA6及CVA10以外的肠病毒A型之病毒颗粒是经纯化及/或去活化。

11.一种制备对抗肠病毒感染的多价免疫组合物的方法，其特征在于：

(a)将CVA6病毒颗粒感染人胚肾293(HEK293)细胞，于人胚肾293(HEK293)细胞之第一培养物中生成CVA6病毒颗粒，并从第一培养物中收集CVA6病毒颗粒；

(b)将CVA10病毒颗粒感染人胚肾293(HEK293)细胞，于人胚肾293(HEK293)细胞之第二培养物中生成CVA10病毒颗粒，并从第二培养物中收集CVA10病毒颗粒；

(c)将CVA16病毒颗粒感染人胚肾293(HEK293)细胞，于人胚肾293(HEK293)细胞之第三培养物中生成CVA16病毒颗粒，并从第三培养物中收集CVA16病毒颗粒；

(d)将EV71病毒颗粒感染人胚肾293(HEK293)细胞，于人胚肾293(HEK293)细胞之第四培养物中生成EV71病毒颗粒，并从第四培养物中收集EV71病毒颗粒；及

(e)结合步骤(a)的CVA6病毒颗粒、步骤(b)的CVA10病毒颗粒、步骤(c)的CVA16病毒颗粒、及步骤(d)的EV71病毒颗粒，以形成多价免疫组合物。

12.如权利要求11所述的方法，其中CVA6病毒颗粒、CVA10病毒颗粒、CVA16病毒颗粒及EV71病毒颗粒是经纯化及去活化。

13.一种对抗肠病毒感染的免疫组合物，包含CVA6病毒颗粒、或CVA10病毒颗粒、或两者，其中CVA6病毒颗粒、或CVA10病毒颗粒、或两者是由HEK293细胞培养物中所生成及收集而得。