[发明专利]用于制备AMG416的方法

权利要求书

1.一种用于制备AMG416的方法，其包括：

提供具有选自Fmoc-D-Cys(Trt)-D-Ala-D-Arg(Pbf) -D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-[树脂] (SEQ ID NO:2)和Ac-D-Cys(Trt)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-[树脂] (SEQ ID NO:3)的结构的树脂-结合的肽；

从所述固体载体切割所述肽；和

活化所述D-Cys残基的侧链。

2.权利要求1的方法，其中所述切割和所述活化在同一容器中发生。

3.权利要求1的方法，其中所述树脂-结合的肽与包含水、三氟乙酸、三异丙基硅烷和二吡啶二硫化物的溶液接触。

4.用于制备AMG416的方法，包括：

提供具有Ac-D-Cys(SPy)-D-Ala-D-Arg-D-Arg-D-Arg-D-Ala-D-Arg-NH₂ (SEQ ID NO:4)结构的肽；和

使所述肽接触l-Cys以产生缀合产物。

5.权利要求4的方法，其中所述肽与包含l-Cys和三氟乙酸的水溶液接触。

6.权利要求4的方法，进一步包括冻干所述缀合产物。

7.权利要求4的方法，进一步包括使所述缀合产物与包含IPA和HCl的水溶液接触，从而产生包含AMG 416 HCl (SEQ ID NO:1)的沉淀物。

8.权利要求7的方法，进一步包括通过HPLC纯化所述沉淀物。

9.用于制备AMG416的方法，包括：

提供在TFA溶液中的具有Ac-D-Cys(SPy)-D-Ala-D-Arg-D-Arg-D-Arg-D-Ala-D-Arg-NH₂ (SEQ ID NO:4)结构的肽；

通过HPLC纯化所述肽；

通过共沸蒸馏进行溶剂交换；和

使所述肽与l-Cys接触以产生缀合产物。

10.权利要求9的方法，其中所述肽与l-Cys和水在IPA中的水溶液接触。

11.权利要求10的方法，进一步包括使所述缀合产物与包含IPA和HCl的水溶液接触，从而产生包含AMG 416 HCl (SEQ ID NO:1)的沉淀物。

12.用于合成D-Arg(Pbf)-OH的方法，包括：

通过混合Boc-D-Arg-OH与PbfCl、NaOH和NaI将所述Boc-D-Arg-OH转化为Boc-D-Arg(Pbf)-OH。

13.权利要求12的方法，进一步包括：

通过混合所述Boc-D-Arg(Pbf)-OH与HCl和IPAc将所述Boc-D-Arg(Pbf)-OH转化为D-Arg(Pbf)-OH。