[发明专利]重复补料分批培养方法

权利要求书

1.一种培养产油破囊壶菌(Thraustochytrid)微生物的方法，其包括以下步骤：

(a)提供包含一种或更多种产油破囊壶菌微生物和培养基的容器，其中所述产油破囊壶菌微生物和培养基形成起始体积；

(b)通过以下在所述容器中培养所述培养基中的产油破囊壶菌微生物：

(i)在利于生物质产生的条件下培养所述产油破囊壶菌微生物；和

(ii)在利于脂质产生的条件下培养步骤(i)中的所述产油破囊壶菌微生物直至所述培养物完成发酵并且达到发酵完成时的阈值体积；

(c)从所述容器收获所述阈值体积的一部分以在所述容器中留下所述起始体积的20％至40％的剩余体积；和

(d)向所述容器中加入使所述培养物的体积返回到所述起始体积的量的新鲜培养基，

其中所述方法包括重复步骤(b)、(c)和(d)，并且其中所述微生物的ATCC登录号为PTA-6245。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述剩余体积为所述起始体积的30％至40％。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述剩余体积为所述起始体积的20％至30％。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其还包括在步骤(b)(ii)过程中检测所述培养物的体积、光密度(OD)、溶解氧(DO)、细胞浓度、二氧化碳产生速率、pH、时间、培养基中营养物的浓度、生物质产率、油产率或其任意组合。

5.根据权利要求4所述的方法，其中检测所述培养基中营养物的浓度，并且其中所述营养物是碳或氮。

6.根据权利要求1所述的方法，其中将所述步骤重复两次或更多次。

7.根据权利要求1所述的方法，其中将所述步骤重复2、3、4、5、6、7、8、9或10次。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其还包括从所述阈值体积的所述收获部分中分离油。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述油包含选自以下的脂肪酸：α亚麻酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十二碳五烯酸、二十碳五烯酸、γ-亚麻酸、亚油酸、亚麻酸及其组合。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述油包含甘油三酯。

11.根据权利要求8所述的方法，其中所述油包含选自以下的脂肪酸：棕榈酸(C16:0)、肉豆蔻酸(C14:0)、棕榈油酸(C16:1(n-7))、顺式-异油酸(C18:1(n-7))、二十二碳五烯酸(C22:5(n-6))、二十二碳六烯酸(C22:6(n-3))及其组合。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述微生物属于破囊壶菌科。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述微生物属于破囊壶菌属。