[发明专利]非复制型转导粒子和基于转导粒子的报道系统

权利要求书

1.细菌细胞包装系统，其用于将报道核酸分子包装至用于导入细菌细胞的非复制型转导粒子（NRTP）中，所述包装系统包括宿主细胞，其包括：

噬菌体基因组，其含有包含破坏的包装起始位点序列的第一末端酶基因，其中在不存在所述破坏的情况下，所述第一末端酶基因编码第一末端酶活性，其中所述第一末端酶活性识别包装起始位点序列，其中所述破坏阻止由第一末端酶活性识别包装起始位点序列，并且其中所述破坏进一步使得第一末端酶活性无功能；和

含有报道核酸分子的质粒，所述报道核酸分子包含报道基因、含有未破坏的包装起始位点序列并编码有功能的第一末端酶活性的第二末端酶基因、和编码第二末端酶活性的第三末端酶基因，其中所述未破坏的包装起始位点序列经配置以促进将所述含有报道核酸分子的质粒的复制子包装至NRTP。

2.权利要求1的细菌细胞包装系统，其中所述噬菌体基因组包含多个破坏的末端酶基因，其中在破坏不存在的情况下，所述多个破坏的末端酶基因各自编码末端酶活性，并且其中所述噬菌体基因组上的多个破坏的基因各自通过由报道核酸分子编码的具功能的未破坏的基因补充。

3.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述第一末端酶基因的破坏是经由破坏包装起始位点的缺失、插入、置换或突变。

4.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述第二末端酶基因和第三末端酶基因可操作地连接至条件启动子。

5.权利要求4的细菌细胞包装系统，其中所述条件启动子是噬菌体基因组的末端酶基因的天然启动子。

6.权利要求4的细菌细胞包装系统，其中所述第二末端酶基因或第三末端酶基因的表达在不存在噬菌体裂解周期激活的情况下受到抑制，并且其中所述第二末端酶基因或第三末端酶基因的表达在噬菌体的裂解周期的激活后被活化。

7.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述噬菌体基因组包含编码可检测标记物或可选择标记物的报道基因并且其中所述报道基因可操作地连接至组成型启动子。

8.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述破坏包括使用编码可选择标记物的基因插入或置换第一包装起始位点序列，并且其中所述编码可选择标记物的基因可操作地连接至组成型启动子。

9.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述破坏的包装起始位点序列包括使用编码可检测标记物的基因插入或置换包装起始位点序列。

10.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述含有报道核酸分子的质粒包含复制起点。

11.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中含有报道核酸分子的质粒的复制子包括适合包装至非复制型转导粒子中的多联体。

12.权利要求1至2中任一项的细菌细胞包装系统，其中所述未破坏的包装起始位点序列包含多联体接合点。

13.用于将报道核酸分子包装至非复制型转导粒子中的方法，所述方法包括：

-为权利要求1至12中任一项的细菌细胞包装系统提供条件，所述条件诱导噬菌体基因组的裂解期以产生包装了含有报道核酸分子的质粒的复制子的非复制型转导粒子；和

-收集包含含有报道核酸分子的质粒的复制子的非复制型转导粒子。

14.一种组合物，其包含由权利要求13的方法产生的包含含有报道核酸分子的质粒的复制子的非复制型转导粒子。