[发明专利]哑铃结构寡核苷酸、包含其的核酸扩增用引物及利用该引物的核酸扩增方法

权利要求书

1.一种以如下通式表示的哑铃结构寡核苷酸，

通式：5′-A_p-B_q-C_r-3′

其中，所述A代表包含具有与所述3′-末端的连续碱基序列互补的碱基序列的核苷酸的5′-低T_m特异性部位，所述B代表包含具有普适碱基的核苷酸的切割部位，所述C代表包含具有与模板核酸的特定连续碱基序列互补的碱基序列的核苷酸的3′-高T_m特异性部位，所述5′-低T_m特异性部位的T_m低于所述3′-高T_m特异性部位的T_m，所述切割部位的T_m低于所述5′-低T_m特异性部位的T_m及所述3′-高T_m特异性部位的T_m，所述5′-低T_m特异性部位的T_m为10～30℃，所述切割部位的T_m为3～10℃，所述3′-高T_m特异性部位的T_m为50～65℃，所述p、q及r代表核苷酸数目，

其中，所述p为3～5，所述q为3～5，所述r为18～30。

2.根据权利要求1所述的哑铃结构寡核苷酸，其特征在于，

所述普适碱基选自由脱氧肌苷、肌苷、7-脱氮-2′-脱氧肌苷、2-氮杂-2′-脱氧肌苷、2′-OMe肌苷、2′-F肌苷及它们的组合所构成的组中。

3.根据权利要求1所述的哑铃结构寡核苷酸，其特征在于，

所述哑铃结构寡核苷酸选自由序列号1至序列号35所构成的组中。

4.一种包含以如下通式表示的哑铃结构寡核苷酸的核酸扩增用引物，

通式：5′-A_p-B_q-C_r-3′

其中，所述A代表包含具有与所述3′-末端的连续碱基序列互补的碱基序列的核苷酸的5′-低T_m特异性部位，所述B代表包含具有普适碱基的核苷酸的切割部位，所述C代表包含具有与模板核酸的特定连续碱基序列互补的碱基序列的核苷酸的3′-高Tm特异性部位，所述5′-低T_m特异性部位的T_m低于所述3′-高T_m特异性部位的T_m，所述切割部位的T_m低于所述5′-低T_m特异性部位的T_m及所述3′-高T_m特异性部位的T_m，所述5′-低T_m特异性部位的T_m为10～30℃，所述切割部位的T_m为3～10℃，所述3′-高T_m特异性部位的T_m为50～65℃，所述p、q及r代表核苷酸数目，

其中，所述p为3～5，所述q为3～5，所述r为18～30。

5.根据权利要求4所述的核酸扩增用引物，其特征在于，

所述普适碱基选自由脱氧肌苷、肌苷、7-脱氮-2′-脱氧肌苷、2-氮杂-2′-脱氧肌苷、2′-OMe肌苷、2′-F肌苷及它们的组合所构成的组中。

6.根据权利要求4所述的核酸扩增用引物，其特征在于，

所述哑铃结构寡核苷酸选自由序列号1至序列号35构成的组中。