[发明专利]从生物样品中分离微泡和提取核酸的方法

权利要求书

1.一种用于从生物样品中提取游离DNA和微泡RNA的方法，所述方法包括：

(a) 在足够使来自所述生物样品的游离DNA和微泡保留于捕获表面之上或其中的条件下，使所述生物样品与所述捕获表面接触，其中所述捕获表面包含带正电并用季铵R-CH₂-N⁺(CH₃)₃官能化的膜或一种或多种珠；

(b) 在游离DNA和所述微泡处于所述捕获表面之上或其中的同时，使所述捕获表面与苯酚基裂解试剂接触，从而从所述样品中释放所述游离DNA和微泡RNA并且产生匀浆；以及

(c) 从所述匀浆中提取所述游离DNA和所述微泡RNA。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述膜或一种或多种珠为用季铵R-CH₂-N⁺(CH₃)₃官能化的阴离子交换剂。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述膜具有至少3 μm的孔径。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述捕获表面包含三个膜，其中所述三个膜直接彼此相邻。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述三个膜彼此相同。

6.如权利要求5所述的方法，其中每个膜为用季铵R-CH₂-N⁺(CH₃)₃官能化的阴离子交换剂。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述生物样品是血浆或血清。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述生物样品具有在0.2 mL至4 mL之间的体积。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述生物样品是尿液、脑脊液或细胞培养上清液。

10.如权利要求1所述的方法，其中步骤(a)进一步包括在使所述生物样品与所述捕获表面接触之前和之后，通过过滤所述生物样品来处理所述生物样品。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述过滤使用0.8 μm过滤器来执行。

12.如权利要求1所述的方法，其中步骤(a)进一步包括在使所述生物样品与所述捕获表面接触之后的离心步骤。

13.如权利要求1或权利要求12所述的方法，其中步骤(a)进一步包括在使所述生物样品与所述捕获表面接触之后洗涤所述捕获表面。

14.如权利要求1所述的方法，其中步骤(b)进一步包括在使所述捕获表面与所述苯酚基裂解试剂接触之后的离心步骤。

15.如权利要求1所述的方法，其中步骤(c)进一步包括向所述匀浆添加氯仿。

16.如权利要求15所述的方法，其中步骤(c)进一步包括在向所述匀浆添加氯仿之前向所述匀浆添加对照。

17.如权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包括步骤(d)乙醇调节来自步骤(c)的提取物；步骤(e)使乙醇调节的提取物结合至硅胶柱；以及步骤(f)从所述硅胶柱洗脱所述提取物。