[发明专利]从多能性干细胞诱导细胞免疫治疗用T细胞的方法

说明书

提供了一种诱导细胞免疫治疗用T细胞的方法，包括以下步骤：(1)提供具有编码期望抗原特异性T细胞受体的基因并且敲除了Rag1和/或Rag2基因的人类多能性干细胞，以及(2)从步骤(1)的所述多能性干细胞诱导T细胞。还提供了一种使用细胞免疫治疗用T细胞的细胞免疫治疗方法和一种细胞免疫治用iPS细胞银行。

技术领域

本申请涉及一种诱导细胞免疫治疗用T细胞的方法。特别是，提供了一种从多能性干细胞(比如iPS细胞)有效可靠地诱导T细胞的方法，该T细胞具有期望抗原特异性T细胞受体基因。本申请还涉及一种利用iPS细胞形成细胞银行的方法，该细胞银行能有效用于细胞免疫治疗。

背景技术

每个T细胞表达具有不同特异性的T细胞受体(TCR)。当传染病发展时，一个具有适合特异性的T细胞会增殖从而形成一个T细胞群(克隆集落(clone))，这种T细胞群会与病原体进行斗争。这是获得性免疫的基本理念。如果有可能人工扩增具有期望抗原特异性TCR的T细胞，就可将扩增的T细胞用于过继性免疫治疗。特异性T细胞的扩增被称为“克隆”。事实上，通过对从患者得到的抗原特异性T细胞进行扩增而制备的多个抗原特异性T细胞的自体移植已进行了临床实施。然而，几乎所有的自体T细胞移植治疗不使用纯化到“克隆的”细胞程度的细胞群。此外，细胞的重复体外培养可能造成杀死癌细胞功能的损失。

业已提出了一种通过使细胞不死化而能够使其无限增殖的T细胞提供方法。可使细胞不死化并对其进行增殖而形成克隆的细胞群。使细胞不死化的方法可以包括细胞与癌细胞的融合以及在存在细胞因子条件下刺激TCR而进行的长期细胞培养。然而，由此获得的不死化T细胞的自体移植可能是危险的。此外，克隆过程可能降低细胞功能。

业已提出了一种细胞免疫疗法，其中，从一个人类T细胞建立多个iPS细胞，再从iPS细胞再生多个T细胞，这些T细胞具有重排的TCR基因，这些重排的TCR基因与诱导出iPS细胞的初始的人类T细胞中的TCR基因相同，将再生的T细胞用于治疗(WO 2013/176197 A1；Vizcardo等，Cell Stem Cell，12：31-36，2013；以及Nishimura T等，Cell Stem Cell，2013)。

根据上述引用文献提供的方法，iPS细胞可以从人类T细胞建立并再分化为成熟T细胞。在iPS细胞分化为成熟T细胞的过程中，TCRα链遭到额外的重排。(Nishimura T等，Cell Stem Cell，2013)。这种额外的TCRα基因重排不仅导致TCR特异性的损失，还可能由于与非期望的链的错误配对而产生自身反应性T细胞。当产生自身反应性T细胞时，可能发生损害正常组织的极其危险的反应。

采用具有在日本人中高频出现的纯合的HLA单倍型的供体形成一种高度通用的iPS细胞银行的项目正在进行中。(CURANOSKI，Nature，卷488：139，2012；以及Shin Kaneko,The Medical Frontline，69：724-733，2014)。T细胞从具有纯合的HLA单倍型的供体移植到具有杂合的HLA单倍型的受体(同种异体移植)一直被视为绝对禁忌。因此，细胞免疫疗的(其中使用从选自iPS细胞银行的iPS细胞再生的具有期望TCR的成熟T细胞)的概念一直被否定。当受体具有杂合的HLA单倍型而供体具有纯合的HLA单倍型时，从受体的免疫系统角度来说，供体的T细胞是自体的(自体移植)，但从供体的T细胞角度来说，受体的体细胞是非自体(异体移植)。由于这个原因，有报告称有引起导致患者死亡的严重的移植物抗宿主反应的危险(Ito等，Lancet，331：413，1988)。引用列表

专利文献

专利文献1：WO2013/176197 A1

专利文献2：WO2011/096482 A1

非专利文献

非专利文献1：Vizcardo等，Cell Stem Cell，12：31-36，2013