[发明专利]抗肿瘤组合物和方法

说明书

发明领域

本发明一般涉及医学和分子生物学领域。特别地，本发明涉及当靶向肿瘤时在人或动物中激活抗肿瘤先天免疫应答的寡核苷酸及其使用方法。

发明背景

一些小的干扰RNA(siRNA)可以引起多种非特异性副作用，包括刺激干扰素和细胞因子产生、蛋白质合成的全面关闭、mRNA的非特异性降解和脱靶效应，其导致基因表达的非特异性降低(Robbins等人，2009)。对于许多siRNA应用，优选特异性基因沉默，并且在施用siRNA后受试者中先天免疫的激活认为是不期望的副作用。

然而，在癌症治疗中，这些免疫刺激性siRNA或“isRNA”可以用作有力的免疫调节剂，用于激活在癌细胞中期望的有益效果，其包括增殖阻断，分化和凋亡。因此，先天免疫系统可以充当肿瘤抑制剂(Shankaran等人，2001；Bui和Schreiber，2007；Koebel等人，2007)，并且免疫刺激剂可以用于抗肿瘤治疗。

然而，仍然需要有效的技术，其能够将先天免疫应答的isRNA激活限于肿瘤细胞并且通常不在人或动物中的非肿瘤细胞中。

发明概述

申请人在此公开了用于将isRNA复合物特异性递送至人或动物中的肿瘤细胞的组合物和方法。一旦将这些复合物递送至肿瘤细胞，isRNA复合物可以在肿瘤细胞中特异性地激活受试者的特异性先天免疫应答，从而诱导有益效果，其包括但不限于增殖阻断，分化和凋亡等。

一方面，本文公开了用于靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物。在某些实施方案中，该组合物包含分离的寡核苷酸，其能够激活肿瘤内的先天免疫应答；肿瘤细胞靶向部分；和其药学上可接受的盐。

一方面，本文公开了用于靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物，其包含能够激活肿瘤内的先天免疫应答的分离的寡核苷酸。在一个实施方案中，组合物的寡核苷酸包含SEQ ID NO：1的核酸序列。在另一个实施方案中，寡核苷酸包含SEQ ID NO：2的核酸序列。在某些实施方案中，寡核苷酸是双链的。在一个实施方案中，寡核苷酸是双链的，并且一条链包含SEQ ID NO：1的核酸序列，而一条链包含SEQ ID NO：2的核酸序列。在另一个实施方案中，寡核苷酸是双链的，并且一条链包含SEQ ID NO：3的核酸序列，而一条链包含SEQ ID NO：4的核酸序列。在另一个实施方案中，寡核苷酸是双链的，并且一条链包含SEQ ID NO：5的核酸序列，而一条链包含SEQ ID NO：6的核酸序列。在一些实施方案中，组合物的寡核苷酸包含一个或多个UG基序。在一些实施方案中，组合物的寡核苷酸的核酸序列包含一个或多个UG基序或者是富含UG的。

在其它实施方案中，所公开的用于靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物的寡核苷酸包含至少一种经修饰的核苷酸，其促进细胞中先天免疫系统的活化。在一个实施方案中，经修饰的核苷酸包括经修饰的核糖。在另一个实施方案中，经修饰的核苷酸包含O-甲基或氟修饰。在某些实施方案中，经修饰的核苷酸位于从所公开的组合物的寡核苷酸的5’端起的第二个位置。

在另一方面，本文公开了用于靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物，其包含肿瘤细胞靶向部分。在某些实施方案中，肿瘤细胞靶向部分是蛋白质、肽或适体。在某些实施方案中，肿瘤细胞靶向部分包含如美国专利号8,680,045中公开的任何细胞靶向部分或结构域，其通过引用整体并入本文以用于任何目的。

在另一方面，如本文公开的用于靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物还包含纳米颗粒。在一些实施方案中，纳米颗粒包含脂质，环糊精，壳聚糖，糖水化合物聚合物，弹性蛋白样聚合物(ELP)，磷酸钙聚合物或其组合。在一个实施方案中，纳米颗粒是聚乙二醇化的。在一个具体实施方案中，纳米颗粒是ELP-L。

在另一个实施方案中，如本文公开的靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物包囊在脂质体中。在一个实施方案中，脂质体是聚乙二醇化的。

在另一方面，本文公开了药物组合物，其包含所公开的用于靶向和抑制肿瘤细胞生长的组合物。在某些实施方案中，药物组合物包含本文公开的组合物和药学上可接受的载体、赋形剂或佐剂。在其它实施方案中，药物组合物包含本文公开的组合物和化疗药物或试剂。在其它实施方案中，药物组合物包含本文公开的组合物和免疫性检查点抑制剂(checkpoint inhibitor)。