[发明专利]依达肝素钠的纯化方法

权利要求书

1.一种获得至少99.0%纯的依达肝素钠的方法，依达肝素钠包含甲基2,3,4-三-O-甲基-6-O-磺酸基-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→4)-2,3,6-三-O-磺酸基-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-2,3-二-O-甲基-α-L-艾杜糖醛酸基-(1→4)-2,3,6-三-O-磺酸基-α-D-吡喃葡萄糖苷壬钠，其特征在于，所述方法包括：

使含依达肝素钠粗产物的溶液流经钠离子交换树脂柱，得到第一混合物；其中，使含所述依达肝素钠粗产物的溶液流经钠离子交换树脂柱的步骤包括：

使依达肝素钠粗产物溶解在第二溶剂中，得到含依达肝素钠粗产物的溶液，所述第二溶剂为水；

使含依达肝素钠粗产物的溶液流经钠离子交换树脂柱；以及

收集并浓缩该钠离子交换树脂柱的洗提液，得到第一混合物；

使含所述第一混合物的溶液流经凝胶色谱柱，得到第二混合物；其中，使所述含第一混合物的溶液流经凝胶色谱柱的步骤包括：

将所述第一混合物溶解在第四溶剂中，得到含第一混合物的溶液，所述第四溶剂包含第一溶剂与第二溶剂的混合物，所述第四溶剂中的第一溶剂的量以第四溶剂的总体积计为4 v/v%至6 v/v%；

使所述含第一混合物的溶液流经凝胶色谱柱；以及

收集并浓缩凝胶色谱柱的洗提液，得到第二混合物；使纯化的依达肝素钠从含所述第二混合物的溶液中沉淀出来，其中，

使所述纯化的依达肝素钠从含第二混合物的溶液中沉淀出的步骤包括：使所述第二混合物溶解在第五溶剂中，得到含第二混合物的溶液，所述第五溶剂为水；使第一溶剂加入所述含第二混合物的溶液中，得到混合溶液；以及冷却所述混合溶液，使纯化的依达肝素钠沉淀出来，以及，

过滤，收集纯化的至少99%纯的依达肝素钠，所述第一溶剂包含醇、酮、乙腈或其混合物；其中所述第一溶剂和所述第五溶剂的体积比为 6:1至12:1，所述混合溶液被冷却到-30℃至15 ℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述依达肝素钠粗产物在第二溶剂中的浓度为0.1至2.0g/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括在收集洗提液期间，用第三溶剂洗涤钠离子交换树脂柱。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第三溶剂包含水。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述钠离子交换树脂柱的目数为100目至200目。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述凝胶色谱柱包括珠状凝胶过滤介质，其中，该过滤介质在碱性条件下通过右旋糖苷与表氯醇交联制得。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述第一混合物在溶液中的浓度为0.1至2.0 g/ml。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述含有第一混合物的溶液流经凝胶色谱柱的步骤重复多次进行。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述凝胶色谱柱的洗提液包含甲醇-水混合物，其中甲醇含量以洗提液总体积计为0 v/v%至10v/v%。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述凝胶色谱柱的洗提液包含甲醇-水混合物，其中甲醇含量以洗提液总体积计为4 v/v%至6v/v%。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一溶剂的醇选自甲醇、乙醇、丙醇、乙二醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、丙三醇及其混合物。

12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一溶剂的酮选自丙酮、丁酮及其混合物。