[发明专利]分离吉西他滨磷酸酯非对映异构体的方法

说明书

本申请涉及使用结晶分离吉西他滨‑[苯基‑苯甲酰氧基‑L‑丙氨酰基)]‑磷酸酯(NUC‑1031)的磷酸酯非对映异构体的方法。特别地，从异丙醇结晶提供了高非对映异构纯形式的吉西他滨‑[苯基‑苯甲酰氧基‑L‑丙氨酰基)]‑(S)‑磷酸酯。本申请还涉及吉西他滨‑[苯基‑苯甲酰氧基‑L‑丙氨酰基)]‑(S)‑磷酸酯的晶型。

技术领域

本发明涉及分离吉西他滨-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的磷酸酯非对映异构体的方法。更具体地，其涉及制备基本上非对映异构纯的形式的(S)-和/或(R)-磷酸酯非对映异构体的方法。

背景技术

吉西他滨(1；商品名)是一种有效的核苷类似物，目前已被证实可治疗乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌和胰腺癌，并广泛用于治疗各种其它癌症，包括膀胱癌、胆道癌、结肠直肠癌和淋巴瘤。

吉西他滨的临床效果受到多种固有耐药机制和获得性耐药机制的限制。细胞水平的耐药取决于三个参数：(ⅰ)激活成磷酸化基团所必需的脱氧胞苷激酶的下调；(ii)核苷转运体特别是通过癌细胞摄取所需的hENT1的降低的表达，和(iii)催化酶尤其是降解吉西他滨的胞苷脱氨酶的上调。

WO2005/012327描述了吉西他滨的一系列核苷酸磷酸酯衍生物和相关的核苷药物分子。其中吉西他滨-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯(NUC-1031；2)被认为是最有效的化合物。这些衍生物似乎避免了很多限制吉西他滨的效果的固有耐药机制和获得性耐药机制(‘Application of ProTide Technology to Gemcitabine:A SuccessfulApproach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a NewAgent(NUC-1031)in Clinical Development’；Slusarczyk et all；J.Med.Chem.；2014,57,1531-1542)。

通常，NUC-1031 2制备为在磷酸酯中心差向异构的两种非对映异构体的混合物。

NUC-1031 2非常亲脂，因此难溶于水(通过计算：0.1mg/mL)，并且可电离基团的计算所得的pKa在适于肠胃外施用的pH范围之外。无论盐含量或pH值如何，它基本不溶于水，这对以足以实现有效治疗的高剂量递送化合物的制剂的发展产生影响。它还对允许NUC-1031以成本有效的方式生产的有效的制造过程的发展产生影响。

最近已经发现吉西他滨-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的(S)-差向异构体3在许多极性有机溶剂与水的混合物中具有足够的溶解度，使其适合于作为治疗剂配制和施用。(R)-差向异构体4的溶解度相当低。在某些溶剂混合物中，(S)-差向异构体和(R)-差向异构体之间的溶解度差异超过100倍。因此，相比于使用(R)-差向异构体或使用混合物所能开发的，预期使用(S)-差向异构体可以开发更临床有效，实用和患者友好的施用方法。因此，期望能够提供基本上非对映异构纯的形式的吉西他滨-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-(S)-磷酸酯3。

NUC-1031在许多溶剂特别是那些通常用于利用HPLC分离化合物的溶剂中的低溶解度，意味着对于基于HPLC的分离，将需要大体积的溶剂。这意味着任何基于HPLC的工业规模的分离方法将需要高成本，消耗大量能量和材料并产生大量废物。

虽然在提交本申请时似乎优选施用作为(S)-差向异构体的吉西他滨-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯，但是也可以设想需要获得非对映异构纯的形式的(R)-差向异构体的原因。这些将包括进行比较试验，将(R)-差向异构体转化为(S)-差向异构体，或者因为(R)-差向异构体提供重要性超过其低溶解度的优于(S)-差向异构体的益处。