[发明专利]微载体的调制方法、微载体及其应用有效
申请号: | 201580057504.X | 申请日: | 2015-10-22 |
公开(公告)号: | CN107073165B | 公开(公告)日: | 2020-02-18 |
发明(设计)人: | 卡洛琳娜·安东尼娅·弗朗辛娜·玛利亚·凡斯普勒韦-古森斯 | 申请(专利权)人: | 富士胶片株式会社 |
主分类号: | A61L27/00 | 分类号: | A61L27/00;C12N5/00 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 葛凡 |
地址: | 日本国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 载体 调制 方法 及其 应用 | ||
本发明的课题在于提供一种能够获得具有特有的性质及粒度分布的多孔微载体的调制方法,并提供一种具有优异的细胞增殖特性的明胶多孔微载体。根据本发明,提供一种包括使用了具有特定HLB值的乳化剂的含量的乳化工序的基因重组明胶多孔微载体的调制方法及具有特定的空隙的明胶多孔微载体。
技术领域
本发明涉及一种明胶多孔微载体、基因重组明胶多孔微载体的调制方法及多孔微载体的应用。
背景技术
人或动物的身体受到损伤时,为小规模的组织损伤时,则通常能够利用自身原本具备的修复系统进行修复。然而,伴随心肌梗塞或外伤之类的严重的组织损伤的损伤常会超过自身的再生能力。为严重的组织损伤时,需要帮助组织修复的处理。
作为由广泛的组织损伤产生的问题之一,存在如何关闭或填充所产生的空间或孔这样的问题点。考虑到该问题,能够使用支架作为用于填充到组织所缺损的部位的空间或孔中的(半)永久性填充材料。并且,支架还能够作为用于放出生长因子和药品的、或用于运送细胞的缓释储存场所来使用。通过在对身体注射或移植细胞之前在支架上预先播种所期望的细胞,从而能够进行细胞运输。
明胶经常以多孔微载体等方式被用作支架的构成材料。因此,明胶多孔微载体的产品引人注目。
专利文献1(WO03/104313)中提出有一种天然明胶多孔微载体的调制方法,其中,尼尔森(Nilsson)能够用作组织再生的支架。尼尔森的调制方法包括两个阶段的乳化工序,在每一个工序中,使用HLB值(hydrophilic-balance)被规定的表面活性剂。尼尔森在第一乳化工序中,对包含HLB值大于9的乳化剂的均匀的水溶性明胶溶液进行调制,并添加包含有机溶剂及HLB值大于9的乳化剂的第一组合物。并且,尼尔森在第二乳化工序中,添加包含有机溶剂及HLB值小于8的乳化剂的第二组合物,将明胶材料进行冷却并使其凝固,最终获得微载体。
发明内容
发明要解决的技术课题
在本发明人等的研究中,本研究人员等通过尼尔森等的天然明胶的方法,从基因重组明胶中,试图调制多孔微载体。然而,将尼尔森的方法用于基因重组明胶时,获得搅拌粉末之类的粒子或不均匀的粒子的块,对于细胞培养,均为不理想。因此,本发明的课题在于提供一种能够获得具有特有的性质及粒度分布的多孔微载体的调制方法。
并且,在本发明人等的研究中,本研究人员等本研究者尝试对具有经改善的细胞增殖特性的多孔微载体进行调制。因此,本发明的课题在于提供一种具有优异的细胞增殖特性的明胶多孔微载体。
用于解决技术课题的手段
本发明人等进行了深入研究,其结果令人惊奇的是本发明人等发现了,能够通过实施第二乳化工序来获得具有细胞增殖优异的性质的基因重组明胶多孔微载体,所述第二乳化工序中,改变尼尔森等上述方法,并使用几乎不包含或完全不包含HLB小于8的乳化剂的非水溶性液体。该发现是与在第二乳化工序中使用显著量的乳化剂的尼尔森的方法完全相反的见解。并且,如以下所详述,为了提供为了基因重组明胶而从以前未知的特有的性质及粒度分布的多孔微载体而能够使用尼尔森的方法中的该变更。
并且,本发明人等惊奇地发现,具有如后述那样定义的特性的微载体能够通过上述方法等进行调制,相比于可在市面上获得的微粒子具有特别优异的细胞增殖特性。
[1]一种基因重组明胶多孔微载体的调制方法,其包括:工序(a),混合包含水、基因重组明胶、非水溶性液体及乳化剂的组合物,生成第一乳液;工序(b),以比明胶的凝胶化温度高的温度混合上述第一乳液和非水溶性液体,生成第二乳液;及工序(c),将第二乳液冷却至明胶凝固的温度,上述工序(b)中所使用的非水溶性液体包含含量小于0.5重量%的HLB值小于8的乳化剂。
[2]根据[1]所述的多孔微载体的调制方法,其中,上述工序(b)中所使用的非水溶性液体不包含HLB值小于8的乳化剂。
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