[发明专利]含有高浓度抗VEGF抗体的稳定蛋白质溶液剂型

说明书

本申请要求2014年12月5日提交的序列号为62/088,061的美国临时申请和2014年11月7日提交的序列号为62/076,770的美国临时申请的优先权，所述公开内容明确并入本文。

技术领域

本发明关于抗VEGF抗体的水性医药剂型、其制备方法和这些剂型的用途。

背景技术

血管内皮生长因子(VEGF)为一种已知的血管生成和新血管形成的调节子，且已展示为与肿瘤和眼内病症相关联的新血管形成的关键介导子(Ferrara等Endocr.Rev.18:4-25(1997))。VEGF mRNA在许多人类肿瘤中过表达，且眼液中VEGF浓度与患有糖尿病和其他缺血相关的视网膜病的患者中血管活跃增生的存在高度相关(Berkman等,J Clin Invest 91:153-159(1993)；Brown等Hμman Pathol.26:86-91(1995)；Brown等Cancer Res.53:4727-4735(1993)；Mattern等Brit.J.Cancer.73:931-934(1996)；和Dvorak等Am J.Pathol.146:1029-1039(1995)；Aiello等N.Engl.J.Med.331:1480-1487(1994))。此外，最近研究已展示受AMD影响的患者中脉络膜新生血管膜中局部性VEGF的存在(Lopez等Invest.Ophtalmo.Vis.Sci.37:855-868(1996))。抗VEGF中和抗体可用于抑制裸鼠中各种人类肿瘤细胞系的生长，也抑制缺血性视网膜病症模型中的眼内血管生成(Kim等Nature 362:841-844(1993)；Warren等J.Clin.Invest 95:1789-1797(1995)；Borgstrom等Cancer Res.56:4032-4039(1996)；和Melnyk等Cancer Res.56:921-924(1996))(Adamis等Arch.Opthalmol.114:66-71(1996))。

许多抗体经批准用于人类和其他哺乳动物的治疗用途，包括抗VEGF抗体。液体医药剂型中治疗抗体的浓度根据例如施用途径而广泛变化。当需要小体积时，通常需要抗体的高浓度剂型。例如，高浓度剂型对于玻璃体内注射或皮下施用而言可以令人满意。

然而，具有高浓度抗体的剂型可能保质期较短，且经调配的抗体可能由于储存期间化学和物理不稳定性损失生物活性。已知聚集、脱酰胺和氧化是抗体降解最普遍的原因。具体地，聚集可潜在地引起患者中免疫反应增加，从而引起安全性担忧。因此，必须将聚集降至最低程度或防止。

生物治疗剂型中颗粒的形成也是主要的质量考虑，因为人类裸眼大体上可看到数十微米至亚毫米和毫米尺寸范围内的颗粒(参见Das,2012,AAPS PharmSciTech,13:732-746)。治疗性眼用制剂中的颗粒可造成对眼睛的损伤。因此，存在规定标准以确保眼用剂型中的亚可见(sub-visible)颗粒物质内容物在一定限度内。例如，美国药典委员会(USP)已设置对于眼用溶液中颗粒物质的要求，诸如通过显微镜法颗粒计数确定的≥10μm直径的粒子的最大数目为50/mL，≥25μm直径的粒子的最大数目为5/mL，以及≥50μm直径的粒子的最大数目为2/mL(参见USP通则<789>)。

已知用于产生高浓度抗体剂型的方法。然而，抗体的氨基酸序列对抗体在各种医药赋形剂、缓冲液等的存在下形成聚集体或降解的趋势有无法预期的影响，尚不存在能克服这一影响的通用方法。此外，制备含可接受水平亚可见粒子的高浓度蛋白质(诸如抗体)的眼用剂型具有挑战性且不可预测。

本发明的一个目的是提供其他改良的具有高浓度抗VEGF抗体以及低水平抗体聚集物和亚可见粒子的剂型，其适于向人类施用，尤其向人眼施用。

发明内容

因此，本发明是关于一种水性医药组合物，其包含适合用于眼用注射的高浓度抗VEGF抗体。在某些方面，本发明的水性医药组合物显示出低至不可检测水平的抗体聚集或降解，其中在制造、制备、运输和长期储存期间极少损失甚至不损失生物活性，抗VEGF抗体的浓度为至少约50mg/ml、60mg/ml、80mg/ml、100mg/ml、120mg/ml、140mg/ml、160mg/ml、180mg/ml或200mg/ml。