[发明专利]制备胶原酶的方法以及利用其制备胶原三肽的方法有效
| 申请号： | 201580061119.2 | 申请日： | 2015-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN107532157B | 公开（公告）日： | 2020-11-10 |
| 发明（设计）人： | 慎镛喆;朴哲;崔守林;王垠善;金利洙;郑真嬉;元主恩;尹智勋 | 申请（专利权）人： | 爱美科生物株式公司 |
| 主分类号： | C12N9/56 | 分类号： | C12N9/56;C12P21/06;C07K14/78;C07K5/08;C07K1/18 |
| 代理公司： | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人： | 张广育;吴溪 |
| 地址： | 韩国庆*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 胶原酶 方法 以及 利用 胶原 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备胶原酶的方法，其特征在于其包括：
第1步骤：离心分离枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BP，其保藏为KCTC 12866BP；
第2步骤：浓缩经离心分离的上清液；
第3步骤：利用离子交换色谱法进行纯化。
2.权利要求1中所述的制备胶原酶的方法，其特征在于：
所述离子交换色谱法利用阳离子交换色谱法，并使用0.1至0.3M浓度的氯化钠(NaCl)。
3.权利要求1中所述的制备胶原酶的方法，其特征在于：
所述离子交换色谱法利用阴离子交换色谱法，并使用0.09至0.155M浓度的氯化钠(NaCl)。
4.一种制备胶原三肽的方法，其特征在于：
其利用通过权利要求1所述的方法制备的胶原酶来制备胶原三肽。
5.一种制备胶原三肽的方法，其特征在于其包含：
第1步骤：将预处理过的鱼鳞和水以2:8的重量比混合，得到混合物；
第2步骤：将所述混合物在90℃下热处理持续5小时；
第3步骤：加入通过权利要求1所述的方法制备的胶原酶并在35℃下降解12小时；
第4步骤：通过离心分离法从第3步骤的成分中去除杂物；
第5步骤：通过离子交换色谱法纯化所述成分；
第6步骤：浓缩所述经纯化的成分；
第7步骤：利用活性炭纯化所述经浓缩的成分；以及
第8步骤：利用过滤器对所述成分进行除菌。
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