[发明专利]用于诱导对单纯疱疹病毒2型(HSV‑2)的免疫应答的治疗组合物和方法

说明书

发明领域

本发明大体上涉及用于诱导对单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的免疫应答的治疗组合物和方法的领域。更具体地，本发明涉及通过引入和表达编码HSV gD2的DNA疫苗来诱导受试者中的免疫应答的方法。

发明背景

单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是疱疹病毒科(Herpesviridae)的成员，并且是生殖器溃疡病的主要原因。该病毒感染了全世界5亿多人(Looker等人，2008)。HSV-2在感觉神经根神经节中达到潜伏状态，并且当身体的免疫功能下降时再激活，引起反复发作(Gupta等人，2007)。然而，控制病毒潜伏期的机制仍然难以捉摸。虽然生殖器疱疹是世界范围高度流行的疾病，但目前没有可用的针对HSV-2感染的疗法。

1.1 HSV-2发病机理

HSV-2进入需要病毒糖蛋白D(gD2)与其受体的复合(complexation)。gD2受体包括疱疹病毒进入介质(HVEM)、连接蛋白-1(nectin-1)和-2以及硫酸肝素中的特异性位点(Spear等人，2000)。在急性HSV感染期间，gD2与HVEM相互作用，导致生殖器粘膜处随后的CD8⁺回忆应答降低(Kopp等人，2012)。

HSV-2还通过降低I型干扰素(即，IFN-α和IFN-β)的水平和增加II型干扰素(即，IFN-γ)的水平改变先天免疫应答(Peng等人，2009)。提出，HSV-2还阻断树突状细胞(DC)成熟和诱导树突状细胞(DC)细胞凋亡并触发促炎细胞因子的释放(Stefanidou等人，2013；和Peretti等人，2005)。HSV-2重新激活导致反复发作，范围从轻度到重度病例。

HSV感染的症状包括生殖器皮肤或粘膜中的水样水疱。病变愈合伴随着疱疹疾病典型的结痂。

1.2对HSV-2的先天性和适应性免疫应答

对HSV-2的强大和稳健的免疫应答需要先天性和适应性免疫应答两者。适应性免疫应答的主要功能在于病毒清除和长期记忆的产生，这是重要研究关注的中心。病毒与先天性免疫细胞(例如，单核吞噬细胞、树突状细胞(DC)和NKT细胞)之间的相互作用通过模式识别受体(PRR)引发免疫应答。PRR识别病原体相关分子模式(PAMP)，例如病毒DNA和RNA。Toll样受体(TLR)是PRR的主要类别并由先天性免疫细胞表达，起到引发免疫应答的作用。

适应性免疫应答由细胞和体液免疫两者组成。适应性免疫应答的主要功能是消除病原体(例如病毒)并诱导针对病原性抗原的长期记忆。通常，适应性免疫应答是由先天性免疫应答触发的。需要CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞二者以引发有效的HSV-2特异性免疫应答(参见Tilton等人，2008)。

细胞毒性免疫通过消除感染病原体(例如，HSV-2病毒)的细胞和除去细胞内病原体例如病毒来补偿体液系统。已经证明呈现足够浓度的外源性施用的抗原联合I类主要组织相容性复合物(MHC)分子以引发足够的免疫应答是有挑战性的。这严重阻碍了针对弱免疫原性病毒蛋白(例如，HSV-2)的疫苗的开发。

在针对已经显示抗体增强感染性的剂(例如病毒)的免疫中，期望提供单独的细胞免疫应答。具体地，公认，对HSV-2的细胞免疫应答对于预防疾病和控制复发性疾病将都是重要的(美国专利号8,828,408)。提供针对慢性和潜伏性病毒感染的这类应答也将是有用的。

1.3当前的针对HSV-2的疫苗制剂

已经考虑了用于针对HSV感染的免疫的几种不同的疫苗制剂策略，包括灭活疫苗、减活疫苗、复制缺陷型疫苗、亚单位疫苗、肽疫苗、活载体疫苗和DNA疫苗。然而，没有单一的策略已经证明是成功的。

合成肽疫苗的使用具有严重的失败，至少因为通常肽不容易与MHC分子相关联、具有短的血清半衰期、快速地被蛋白水解并且不特异地定位于呈递抗原的单核细胞和巨噬细胞。

灭活病毒疫苗通常免疫原性差并且具有低功效。此外，据报道，这类疫苗展示出增加癌症易感性的潜力，并且因此目前没有被继续进行。