[发明专利]用于利用免疫荧光的酶免疫测定的组合物及其用途

权利要求书

1.用于利用免疫荧光的酶免疫测定的组合物，其包含(i)荧光生成酶促底物，其在酶促水解之后形成荧光产物和第二反应产物，其中所述组合物还包含(ii)猝灭的荧光生成化合物，其在所述荧光生成酶促底物(i)酶促水解之后通过与所述第二反应产物反应形成荧光化合物。

2.权利要求1的组合物，其特征在于所述荧光生成酶促底物选自4-甲基伞形酮基磷酸酯(4-MUP)、4-甲基伞形酮基半乳糖苷(4-MUG)、4-甲基伞形酮基硫酸酯(4-MUS)、荧光素二磷酸酯(FDP)、6,8-二氟-4-甲基伞形酮基磷酸酯(DiFMUP)、9H-(1,3-二氯-9,9-二甲基吖啶-2-酮-7-基)磷酸酯(DDAO磷酸酯)、2′-[2-苯丙噻唑]-6′-羟基苯丙噻唑磷酸酯、2-萘基磷酸酯和2-伞形酮基磷酸酯。

3.权利要求2的组合物，其特征在于所述荧光生成酶促底物是4-甲基伞形酮基磷酸酯(4-MUP)。

4.前述权利要求中任一项的组合物，其特征在于所述猝灭的荧光生成化合物是猝灭的化学传感器-阳离子复合物。

5.权利要求4的组合物，其特征在于所述猝灭的化学传感器-阳离子复合物中的化学传感器选自亲水性香豆素和苯并咪唑衍生物，并且所述猝灭的化学传感器-阳离子复合物中的阳离子选自Co²⁺、Cr³⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Hg²⁺和Pb²⁺。

6.权利要求5的组合物，其特征在于所述猝灭的化学传感器-阳离子复合物选自：

-钙黄绿素蓝-Co²⁺复合物和

-N-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-苯基]-N-[(E)-1-(1H-吡咯-2-基)亚甲基]胺-Cu²⁺复合物。

7.权利要求4的组合物，其特征在于所述荧光生成酶促底物是4-甲基伞形酮基磷酸酯(4-MUP)，并且所述猝灭的化学传感器-离子复合物是钙黄绿素蓝-Co²⁺复合物。

8.用于利用免疫荧光的酶免疫测定的试剂盒，其包含权利要求1-7中任一项的组合物。

9.用于免疫分析的自动化装置，其包含权利要求1-7中任一项的组合物或权利要求8中的试剂盒。

10.前述权利要求中任一项的组合物、试剂盒或自动化装置在利用分析物的免疫荧光的酶免疫测定中的用途。

11.通过利用可能包含分析物的液体测试样品的免疫荧光的酶免疫测定体外检测和/或定量所述分析物的方法，其包括以下步骤：

-使预先连接至或未连接至固体表面的捕获配对物与所述液体样品在一起以使所述分析物结合至所述捕获配对物；

-添加检测配对物以结合至所述捕获配对物-分析物复合物，所述检测配对物直接或间接偶联至能够裂解权利要求1-7中任一项的组合物中的所述荧光生成酶促底物的酶；

-使权利要求1-7中任一项的组合物和所述捕获配对物-分析物-检测配对物复合物在一起以形成反应介质；以及

-通过免疫荧光通过测量反应介质中发出的荧光检测分析物的存在和/或量。

12.权利要求11的体外检测和/或定量分析物的方法，其包括至少一个以下步骤：

在添加所述检测配对物之前的漂洗步骤以便消除未结合至所述捕获配对物-分析物复合物的分析物；以及

在添加所述检测配对物之后的漂洗步骤以便消除所述未结合的检测配对物。