[发明专利]用于生产冷杉醇的方法有效
| 申请号： | 201580072979.6 | 申请日： | 2015-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN107109393B | 公开（公告）日： | 2021-08-03 |
| 发明（设计）人： | 约翰·罗耶 | 申请（专利权）人： | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88 |
| 代理公司： | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人： | 肖善强 |
| 地址： | 荷兰*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 生产 冷杉 方法 | ||
1.一种生产冷杉醇的方法，所述方法包括：在II类二萜合酶(diTPS)和双功能I/II类顺式冷杉醇合酶(CAS)的组合的存在下，将香叶基香叶基二磷酸(GGPP)转化为冷杉醇，其中，所述II类diTPS将GGPP转化为赖百当烯醇二磷酸，所述双功能I/II类顺式冷杉醇合酶将GGPP转化为赖百当烯醇二磷酸并且将赖百当烯醇二磷酸转化为冷杉醇，其中所述II类diTPS的氨基酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，以及所述双功能I/II类顺式冷杉醇合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。
2.权利要求1所述的方法，其中由重组表达所述II类diTPS和所述双功能I/II类顺式冷杉醇合酶两者的宿主细胞生产冷杉醇。
3.权利要求2所述的方法，其中所述宿主细胞是真菌。
4.权利要求2-3中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞是经遗传修饰的重组微生物，其被遗传修饰以表达所述II类diTPS的外源多肽和所述双功能I/II类顺式冷杉醇合酶的外源多肽。
5.权利要求4所述的方法，其中所述重组微生物包含编码所述II类diTPS的氨基酸序列的一种核酸和编码所述双功能I/II类顺式冷杉醇合酶的氨基酸序列的一种核酸。
6.权利要求3所述的方法，其中所述宿主细胞是解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)。
7.宿主细胞，其包含异源II类diTPS和异源双功能I/II类顺式冷杉醇合酶，所述II类diTPS的氨基酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，所述双功能I/II类顺式冷杉醇合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。
8.权利要求7所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是真菌。
9.权利要求8所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)细胞。
10.表达载体，其包含编码选自(1)SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2和(2)SEQ ID NO：3的氨基酸序列的多核苷酸分子。
11.权利要求10所述的表达载体，其中所述多核苷酸分子可操作地连接到相同的转录控制序列。
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