[发明专利]芸苔属事件LBFLFK和LBFDAU及其检测方法

说明书

本发明提供转基因芸苔属事件LBFLFK和LBFDAU及其后代，和包含这些事件的诊断性DNA的细胞、种子和植物。本发明也提供人工寡核苷酸引物和探针，其可以用于在样品中诊断LBFLFK事件和LBFDAU事件及其后代；并提供在样品中检测LBFLFK事件和LBFDAU事件及其后代的存在的方法。本发明还提供衍生自LBFLFK事件和LBFDAU事件的油和商业产品。

本申请要求2014年11月14日提交的美国临时专利申请序列号62/079,622和2015年9月29日提交的美国临时专利申请序列号62/234373的优先权，所述文献的完整公开内容通过引用方式并入本文。

作为本公开的组成部分，序列表作为文本文件与本说明书同时提交。序列表的主题通过引用的方式完整并入本文。

技术领域

本发明涉及生物技术和农业领域，并且更具体地，涉及包含事件LBFLFK或事件LBFDAU的转基因芸苔属植物、其后代植物、种子和从中衍生的油和粕(meal)。本发明还涉及用于检测生物样品中存在事件LBFLFK或事件LBFDAU的方法，所述方法利用每个事件独有的核苷酸序列。

发明背景

近年来已经日益确立了极长链多不饱和脂肪酸(“VLC-PUFA”或“PUFA”)对人类和动物营养的健康益处。特别地，ω3PUFA二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)在神经发育、免疫应答和炎症反应中发挥作用。此外，含有EPA和DHA的膳食补充剂用来减轻心血管和神经学病变，并且可以用于治疗一些癌症。

EPA和DHA的当前商业来源是鱼油。但是，海洋储备正在削减，并且需要EPA和DHA的备选来源以满足日益增长的需求。已经做出许多努力以开发产生VLC-PUFA(包括EPA和DHA)的转基因油籽植物。参见，例如，WO 2004/071467、WO 2013/185184、WO 2015/089587，Ruiz-Lopez等人,(2014)Plant J.77,198-208。但是，以商业意义的水平产生EPA和DHA的转基因油籽植物尚未商业化。

已经在WO2001/059128、WO2004/087902和WO2005/012316中描述了编码显示出Δ-6-延伸酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自展叶剑叶藓(Physcomitrellapatens)的这种酶。

已经在WO2002026946和WO2003/093482中描述了编码显示出Δ-5-去饱和酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自破囊壶菌属物种(Thraustochytrium sp.)的这种酶。

已经在WO2005/012316、WO2005/083093、WO2006/008099和WO2006/069710中描述了编码显示出Δ-6-去饱和酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自托瑞蚝球藻(Ostreococcus tauri)的这种酶。

已经在WO2005/012316、WO2005/007845和WO2006/069710中描述了编码显示出Δ-6-延伸酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自假微型海链藻(Thalassiosirapseudonana)的这种酶。

已经例如在WO2006100241中描述了编码显示出Δ-12-去饱和酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自大豆疫霉(Phytophthora sojae)的这种酶。

已经在WO2005/012316和WO2007/096387中描述了编码显示出Δ-5-延伸酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自托瑞蚝球藻的这种酶。

已经例如在WO2008/022963中描述了编码显示出ω3-去饱和酶活性的多肽的多核苷酸，所述文件描述来自畸雌腐霉(Phytium irregulare)的这种酶。