[发明专利]包含纤溶酶原的药物组合物和其用途

说明书

本发明公开了包含纤溶酶原或其生物活性变体的药物组合物。在一个实施方案中，所述组合物包含张力调节剂、填充剂以及稳定剂，并且具有约3.0至约10.0的pH值。在另一个实施方案中，所述组合物含有低于每100ml 6000个粒子并且优选低于每100ml 2000个粒子的量的等于或大于10μm的呈悬浮形式的粒子。涵盖这些组合物作为药剂的用途。还涵盖这些药物组合物的各种治疗用途。

发明领域

本发明涉及医学领域。更具体地说，本发明涉及一种包含纤溶酶原的药物组合物和其治疗用途。

发明背景

纤溶酶原为如图1A中所示的纤溶酶的酶原。图1B中展示了人类纤溶酶原前体的氨基酸序列。人类纤溶酶原含有791个氨基酸(前体＝810个氨基酸)，并且分子量为约90kDa并且pI为约7.0，不过差异糖基化和/或N端活化肽的移除可产生6.2至8.0的pI范围。具有24个链内二硫键、5个环状结构域(kringle domain)(结合于纤维蛋白和α2-抗纤溶酶抑制剂时所涉及)、丝氨酸蛋白酶结构域(P)以及活化肽(AP)的单链蛋白质组成头77个氨基酸。存在一个N-键联糖基化位点和一个O-键联位点，不过已识别出第二O-键联位点(Goldberg,2006)。循环中的纤溶酶原约70％仅含有O-键联糖基化，而其余部分含有N-键联糖与O-键联糖两者。

天然纤溶酶原以两种主要形式产生，即Glu-纤溶酶原(Glu-Pg)和Lys-纤溶酶原(Lys-Pg)，它们是针对谷氨酸或赖氨酸的N端氨基酸加以命名。Glu-Pg由通过基因序列命名的整个氨基酸序列(排除活化肽)组成，而Lys-Pg为Glu-Pg在Lys-77与Lys-78(在图1B中加下划线)之间裂解的结果。Lys-Pg的循环半衰期明显比Glu-Pg短(Glu-Pg为2-2.5天，Lys-Pg为0.8天)。Glu-Pg为存在于血浆中的Pg的主导形式，并且在循环中检测到极少的Lys-Pg(Violand,B.N.,Byrne,R.,Castellino F.J.(1978)The effect ofα-,ω-Amino Acids onHuman Plasminogen Structure and Activation.J Biol Chem.253(15):5395-5401；Collen D,Ong EB,Johnson AJ.(1975)Human Plasminogen:In Vitro and In VivoEvidence for the Biological Integrity of NH₂-Terminal Glutamic AcidPlasminogen.Thrombosis Research.7(4):515-529)。

纤溶酶原是在肝脏中合成并且分泌至血浆中。纤溶酶原分布于整个身体中并且当存在活化的条件时，纤溶酶原(plasminogen pro-enzyme)由纤溶酶原活化剂(t-PA)或由尿激酶纤溶酶原活化剂(u-PA)转化为活性酶纤溶酶。然后，纤溶酶降解纤维蛋白并且将潜伏性基质金属蛋白酶(pro-MMP)转化成活性MMP，活性MMP又进一步降解细胞外基质(ECM)作为组织愈合/重建过程的一部分。纤维蛋白稳态中主要涉及由t-PA介导的纤溶酶原激活，而经由u-PA产生纤溶酶，从而与其受体u-PAR形成复合物在组织重建中起作用。

现在或曾经研究了纤溶酶用于清除人造装置和血液透析移植物中的血栓性阻塞以及用于治疗玻璃体后脱离(PVD)的潜在用途(US 6,969,515；US2010/0104551)。

研究了纤溶酶原在治疗适应症，诸如伤口愈合、鼓膜穿孔愈合、牙周伤口愈合、传染性疾病、口腔健康、糖尿病性溃疡、溶栓适应症(诸如冠状动脉血栓形成)、组织的再灌注损伤、缺血、梗塞、脑水肿；改善微循环以及调节补体途径中的用途(US 8,637,010；US 8,679,482；US 8,318,661；WO 95/12407；EP 0,631,786)。迄今为止，当前药物市场上仍没有作为药物的纤溶酶原。